一例油红o染色步骤
油红O为脂溶性染料,在脂肪内能高度溶解,可特异性的使组织内甘油三酯等中性脂肪着色。下面是一例油红o染色步骤,仅供参考。
1、油红O干液的配制:油红O干粉0.4g加入到1 OmL,异丙醇(分析纯)中,密封,置于37℃水浴加温,使其充分溶解,干液可长期室温保存。
2、油红O染液的配制:干液与三蒸水以3: 2比例混合,混匀后过滤,取滤液作为新鲜染液,此染色液2h内使用。
3、细胞处理好后,用PBS洗3次,用滤纸吸去多余水份,50%异丙醇固定1min或10%中性甲醛固定10min,
4、油红O染色液染色10-15min,染色时需加盖,以免异丙醇挥发,染料沉淀;
60%异丙醇洗去多余染液,三蒸水冲洗3次;
5、Mayer氏苏木素复染5-l0min, 1%盐酸分色及返蓝后,三蒸水漂洗1 0min。倒置显微镜下观察并拍照记录。