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Wako(和光纯药)标准品 氨基酸分析用标准品

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Wako(和光纯药)标准品 氨基酸分析用标准品

货号      名称                                       规格

167-08761 PTH-DL-Valine Standard            100mg
160-08991 PTH-DL-Tryptophan Standard    100mg
162-08691 PTH-L-Tyrosine Standard            100mg
167-09001 PTH-delta-threonine Standard     100mg
166-08971 PTH-DL-Threonine Standard        100mg
169-08961 PTH-DL-Serine Standard           100mg
160-08751 PTH-L-Proline Standard             100mg
163-08741 PTH-L-Phenylalanine Standard 100mg
166-08731 PTH-DL-Norvaline Standard         100mg
169-08721 PTH-DL-Norleucine Standard        100mg
161-08801 PTH-DL-Methionine Standard 100mg
161-08781 PTH-L-Lysine Standard               100mg
165-08681 PTH-L-Leucine Standard            100mg
164-08771 PTH-DL-Isoleucine Standard        100mg
168-08791 PTH-L-Histidine Hydrochloride Standard?PTH-L-组氨酸盐酸盐标准品 100mg
168-08671 PTH-glycine Standard                 100mg
165-08701 PTH-L-Glutamine Standard        100mg
166-08851 PTH-L-Glutamic Acid Standard   100mg
169-13591 PTH-S-Carboxymethylcysteine Standard PTH-S-羧甲基半胱氨酸标准品 100mg
164-09011 PTH-L-Cysteic Acid Potassium Salt Standard PTH-L-磺基丙氨酸钾盐标准品 100mg 168-08811 PTH-L-Citrulline Standard              100mg
162-08711 PTH-L-aspartic Acid Standard       100mg
163-08981 PTH-L-Arginine Hydrochloride Standard PTH-L-精氨酸盐酸盐标准品 100mg
165-08821 PTH-DL-2-aminoisobutyric Acid Standard PTH-DL-2-氨基异丁酸标准品 100mg
162-08831 PTH-DL-2-aminobutyric Acid Standard PTH-DL-2-氨基丁酸标准品 100mg
163-12271 PTH-amino Acids Mixture Standard PTH-氨基酸混合物标准品 100mg
161-08661 PTH-DL-α-alanine Standard         100mg
016-14131 L-Asparagine Standard Solution L-天冬酰胺标准溶液    1mLx5

013-08391  Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 氨基酸混合物标准溶液, H型 5ml

019-08393 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 氨基酸混合物标准溶液, H型 1mLx5A

016-08641 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 氨基酸混合物标准溶液, B型 5ml

012-08643 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 氨基酸混合物标准溶液, B型 1mLx5A

015-14461 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2
氨基酸混合物标准溶液, AN-2型     5ml
011-14463 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2
氨基酸混合物标准溶液, AN-2型  1mLx5A

货号 品名 规格 价格RMB

011-14463 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2 1 mL x5A

015-14461 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2 5ml

简介

用于氨基酸自动分析仪或高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸成分分析或测序。

The product contains 12 kinds of compounds in addition to 14 common acidic and neutral amino acids.

Contents

组成(溶于约 0.1 mol/L盐酸溶液)：

o-Phosphoserine (1.25 micro moles/mL) o-磷酸丝氨酸

Taurine (1.25) 牛磺酸

o-Phosphoethanolamine (1.25) O-磷酸乙酰胺

Urea (50.0) 尿素

L-Aspartic Acid (2.50) L -天门冬氨酸

Hydroxy-L-proline (2.50) 羟基L -脯氨酸

L-Threonine (2.50) L-苏氨酸

L-Serine (2.50) L-丝氨酸

L-Glutamic Acid (2.50) L -谷氨酸

Sarcosine (6.25) 肌氨酸

L-alpha-Aminoadipic Acid (1.25) L-α-氨基己二酸

L-Proline (2.50) L -脯氨酸

Glycine (2.50) 甘氨酸

L-Alanine (2.50) L -丙氨酸

L-Citrulline (2.50) L -瓜氨酸

DL-alpha-Amino-n-butyric Acid (1.25) DL-α-氨基-N-丁酸

L-Valine (2.50) L -缬氨酸

L-Cystine (2.50) L -胱氨酸

L-Methionine (2.50) L -蛋氨酸

L-Cystathionine (1.25) L型胱硫醚

L-Isoleucine (2.50) L -异亮氨酸

L-Leucin (2.50) L -亮氨酸

L-Tyrosine (2.50) L -酪氨酸

L-Phenylalanine (2.50) L -苯丙氨酸

beta-Alanine (2.50) β -丙氨酸

DL-beta-Aminoisobutyric Acid (2.50) DL型β-aminoisobutyric酸

货号 品名 规格 价格

012-08643 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 1 mL x5A

016-08641 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 5ml

Summary

用于氨基酸自动分析仪或高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸成分分析或测序。

The product contains 3 common basic amino acids and 9 other compounds.It is used for amino acid composition analysis and sequencing using amino acid analyzer and high performance liquid chromatography (HPLC).

组成 (每种氨基酸浓度2.50 micro moles/mL，溶于约0.1 mol/L盐酸溶液)：

γ-氨基丁酸gamma-Aminobutyric Acid

乙醇胺 Ethanolamine

氯化铵Ammonium Chloride

异羟赖氨酸 DL-plus allo-delta-Hydroxylysine

L-鸟氨酸L-Ornithine

L-赖氨酸L-Lysine

L-1-甲基组氨酸L-1-Methylhistidine

L-组氨酸L-Histidine

L-3-甲基组氨酸L-3-Methylhistidine

L-鹅肌肽L-Anserine

L-肌肽L-Carnosine

L-精氨酸L-Arginine

货号 品名 规格 价格

013-08391 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 5ml

019-08393 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 1 mL x5A

简介：

用于氨基酸自动分析仪或高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸成分分析或测序。

The product contains 17 common amino acids and ammonium chloride formed through hydrolysis of glutamine and asparagine.It is used for amino acid composition analysis and sequencing using amino acid analyzer and high performance liquid chromatography (HPLC).

Contents (in approx. 0.1 mol/L HCl solution):

L -天冬氨酸L-Aspartic Acid

L -苏氨酸L-Threonine

L -丝氨酸L-Serine

L -谷氨酸L-Glutamic Acid

L -脯氨酸L-Proline

甘氨酸Glycine

L -丙氨酸L-Alanine

L –半胱氨酸L-Cystine

L -缬氨酸L-Valine

L -蛋氨酸L-Methionine

L -异亮氨酸L-Isoleucine

L –亮氨酸 L-Leucin

L -酪氨酸L-Tyrosine

L -苯丙氨酸L-Phenylalanine

L -赖氨酸L-Lysine

L -组氨酸L-Histidine

氯化铵A mmonium Chloride

L -精氨酸L-Arginine

(每种氨基酸浓度2.50 micro moles/mL，溶于约0.1 mol/L盐酸溶液)

構成

本品1びんは、20種のPTH-アミノ酸各20nmolを含む。[( )内は分子量およびアミノ酸略号]

PTH- DL – α -丙氨酸PTH-DL-α-Alanine(206.27 : A)

PTHL -精氨酸盐酸PTH-L-ArginineHCl(372.84 : R)

PTH-L-天冬酰胺PTH-L-Asparagine(249.29 : N)

PTH- L -天门冬氨酸PTH-L-Aspartic Acid(250.28 : D)

PTH- L -谷氨酸PTH-L-Glutamic Acid(264.31 : E),

PTH- L -谷氨酰胺PTH-L-Glutamine(263.32 : Q),

PTH-甘氨酸PTH-Glycine(192.24 : G),

PTH- L -组氨酸盐酸PTH-L-HistidineHCl(308.79 : H),

PTH- L -异亮氨酸PTH-L-Isoleucine(248.35 : I),

PTH- L -亮氨酸PTH-L-Leucine(248.35 : L),

PTH- L -赖氨酸盐酸盐PTH-L-Lysine(398.55 : K),

PTH- DL -蛋氨酸PTH-DL-Methionine(266.39 : M),

PTH- L -苯丙氨酸PTH-L-Phenylalanine(282.37 : F),

PTH- L -脯氨酸PTH-L-Proline(232.31 : P),

PTH- DL -丝氨酸PTH-DL-Serine(222.25 : S),

PTH-DL-苏氨酸PTH-DL-Threonine(236.29 : T),

PTH- δ -苏氨酸PTH-Δ-Threonine(218.27 : ΔT),

PTH-DL-色氨酸PTH-DL-Tryptophan(321.39 : W),

PTH- L -酪氨酸PTH-L-Tyrosine(298.37 : Y),

PTH- DL -缬氨酸PTH-DL-Valine(234.32 : V)

使用法

1. PTH-アミノ酸混合標準品の容器に移動相2.0mlを加え、完全に溶解する。(各PTH-アミノ酸の濃度は10nmol/mlとなる。)

2. 必要量をHPLCに注入し(10μl注入の場合、PTH-アミノ酸は各々100pmolとなる。)標準クロマトグラムを作成する。

用途 PTH-アミノ酸の同定又は定量用標準液。

PTH-DL-α-丙氨酸PTH-DL-α-Alanine

PTH-DL-2-氨基丁酸PTH-DL-2-Aminobutyric acid

PTH-DL-2-氨基异丁酸PTH-DL-2-Aminoisobutyric acid

PTH-L-精氨酸盐酸PTH-L-ArginineHCl

PTH-L-天冬酰胺PTH-L-Asparagine

PTH-L-天冬氨酸PTH-L-Aspartic Acid

PTH-L-羧甲基半胱氨酸PTH-L-Carboxymethylcysteine

PTH-L-瓜氨酸PTH-L-Citrulline

PTH-L-磺酸钾盐PTH-L-Cysteic Acid Potassium Salt

PTH-L-谷氨酸PTH-L-Glutamic Acid

PTH-L-谷氨酰胺PTH-L-Glutamine

PTH-甘氨酸PTH-Glycine

PTH-L-组氨酸盐酸盐PTH-L-HistidineHCl

PTH-L-异亮氨酸PTH-L-Isoleucine

PTH-L-亮氨酸PTH-L-Leucine

PTH-L-赖氨酸PTH-L-Lysine

PTH-DL-蛋氨酸PTH-DL-Methionine

PTH-DL-正缬氨酸PTH-DL-Norvaline

PTH-DL-正亮氨酸PTH- DL-Norleucine

PTH-L-苯丙氨酸PTH-L-Phenylalanine

PTH-L-脯氨酸PTH-L-Proline

PTH-DL-丝氨酸PTH-DL-Serine

PTH-DL-苏氨酸PTH-DL-Threonine

PTH-delta-苏氨酸PTH-delta-Threonine

PTH-DL-色氨酸PTH-DL-Tryptophan

PTH-L-酪氨酸PTH-L-Tyrosine

PTH-DL-缬氨酸PTH-DL-Valine

wako疫苗生产用相关试剂

发表于由

Wako疫苗生产用相关试剂

上海金畔生物代理wako全线产品，欢迎咨询。

疫苗生产用相关试剂-日本和光Wako原装进口

1、原料

产品编号 英文名称 中文名称 包装 CAS 用途
346-01373 HEPES 4-羟乙基哌嗪乙磺酸 100g 7365-45-9 生物缓冲液
035-23611 CultureSure L-Glutamine, Animal-derived-free L-谷氨酰胺，不存在动物源成分 100g 56-85-9 用于细胞培养
033-23391 CultureSure® 10w/v% Polyoxyethylene Polyoxypropylene Glycol Solution F68丙二醇嵌段聚醚 100ml 9003-11-6 用于细胞培养，消泡剂
160-25231 Polyoxyethylene Polyoxypropylene Glycol (160E.O.) (30P.O.) F68丙二醇嵌段聚醚 100g 9003-11-6 生化级别，消泡剂
072-04945 Glycerol 甘油 500mL 56-81-5 用于分子生物学，DNase活性、RNase活性检出限以下
072-05285 Glycine 甘氨酸 500g 56-40-6 用于分子生物学，DNase活性、RNase活性检出限以下
077-05095 Glycine 甘氨酸 500g 56-40-6 日本药典级，98.5+% (乾燥後)
036-23881 CultureSure® Glycine, Animal-derived-free 甘氨酸 100g 56-40-6 用于细胞培养
122-06311 L-Leucine, Animal-derived-free L-亮氨酸，不存在动物源成分 100g 61-90-5 生化级别，不含L-异亮氨酸
031-23711 L-Leucine, Animal-derived-free L-亮氨酸，不存在动物源成分 100g 61-90-5 用于细胞培养，通过支原体试验
037-23791 CultureSure L-Lysine Hydrochloride, Animal-derived-free L-赖氨酸盐酸盐 100g 657-27-2 用于细胞培养，通过支原体试验
036-23761 CultureSure L-Methionine, Animal-derived-free L-蛋氨酸 100g 63-68-3 用于细胞培养，通过支原体试验
2、纯化
202-07881 2-Amino-2-hydroxymethyl-1,3-propanediol Tris （三羟甲基氨基甲烷） 100g 77-86-1 生化级别，99.0+% (Titration)
215-00616 Urea 尿素 1kg 57-13-6 用于生物化学
017-06731 Ammonium Sulfate 硫酸铵 1kg 7783-20-2 酶精制，一般生化研究用
038-02101 Hexadecyltrimethylammonium Bromide CTAB十六烷基三甲基溴化铵 100g 57-09-0 表面活性剂，98.0+% (Titration)
190-13921 Sodium Chloride 氯化钠 1kg 7647-14-5 用于分子生物学，DNase活性、RNase活性检出限以下
054-07225 Ethanol(99.5) 乙醇 500mL 64-17-5 用于分子生物学，DNase活性、RNase活性检出限以下
3、偶联剂
011-06795 Adipodihydrazide 己二酰肼 500g 1071-93-8 97.0+% (Titration)
338-10301 WSCD.HCl 1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐 5g 25952-53-8
4、裂解剂
196-15721 Sulfobetain 3-14 ZWITTERGENT 3-14(十四烷基磺基甜菜碱 ) 5g 14933-09-6 用于细胞生物学
166-21213 Polyoxyethylene(20) Sorbitan Monolaurate 吐温-20 100g 9005-64-5 用于分子生物学，DNase活性、RNase活性检出限以下
166-21595 Polysorbate, from Plants 吐温-80 500g 9005-65-6 生化用分散剂乳化剂
169-09125 Polyethylene Glycol 6,000 聚乙二醇6000（PEG6000） 500g 25322-68-3 润滑剂
5、灭活剂
194-08311 Sodium Deoxycholate 脱氧胆酸钠 100g 302-95-4 生化级别，配制培养基
077-06271 25% Glutaraldehyde Solution 戊二醛 25% 10ml×10A 111-30-8 组织固定液，用于电子显微镜
166-21012 β-Propiolactone β-丙内酯 25mL 57-57-8 灭活剂
063-04815 Formaldehyde Solution 37%甲醛溶液（福尔马林） 500mL 50-00-0 分子生物学用，DNase活性、RNase活性在检出限以下
6、防腐剂
160-12725 Phenol, Crystals 苯酚 药典级 500g 108-95-2 用于DNA, RNA抽提精制
030-20925 m-Cresol 间甲酚 500mL 108-39-4 用于生化
7、冻干
077-03155 Gelatin 明胶 500g 9000-70-8 培养基
128-00095 Lactose Monohydrate 乳糖 500g 5989-81-1 医药品原料
196-13705 Sucrose 蔗糖 500g 57-50-1 日本药典级，医药制剂原料
8、佐剂
012-24241 Aluminium Hydroxide Gel 氢氧化铝凝胶 5ml 21645-51-2 吸附剂，用于免疫化学
016-01865 Aluminium(III) Chloride Hexahydrate 结晶氯化铝 500g 7784-13-6
9、QC检测试剂
297-73101 Protein Assay BCA Kit BCA 蛋白分析试剂盒 250次 N/A 用于蛋白质定量
016-14131 L-Asparagine Standard Solution L-天冬素标准溶液 1mL×5 70-47-3 氨基酸自动分析标准溶液，含有L-Asparagine (N) (1.25μmol/ml)的水溶液
10、其它
207-19982 Trypsin 1:250, from Porcine Pancreas 胰酶 1：250 25g 9002-07-7 用于细胞培养
016-15091 Albumin, from Bovine Serum (BSA), Crystallized 牛血清白蛋白 1g 9048-46-8 生化级别
045-16463 β-Diphosphopyridine Nucleotide, from Yeast 辅酶I（NAD） 1g 53-84-9 生化级别
166-11801 Polyoxyethylene(10) Octylphenyl Ether 曲拉通X-100 3L 9002-93-1 乳化剂
127-02765 D(-)-Fructose D-果糖 500g 57-48-7 99.0+% (HPLC)
044-29765 D-MEM (High Glucose) with L-Glutamine and Phenol Red D-MEM (高糖)，带有L-谷氨酰胺和酚红 500mL N/A 液体培养基，用于细胞培养，品质检验指标：外观、pH、渗透压、细胞内毒素试验、支原体检测、无菌检测、细胞培养试验
043-30085 D-MEM(High Glucose) with L-Glutamine, Phenol Red and Sodium Pyruvate D-MEM (高糖)，带有L-谷氨酰胺、酚红和丙酮酸 500mL N/A
049-32645 D-MEM(High Glucose) with L-Glutamine, Phenol Red, Sodium Pyruvate and 1,500mg/l Sodium Bicarbonate D-MEM (高糖)，带有L-谷氨酰胺、酚红、丙酮酸和1,500mg/l碳酸氢钠 500mL N/A
042-32255 D-MEM(No Glucose) with L-Glutamine and Phenol Red D-MEM (无糖)，带有L-谷氨酰胺和酚红 500mL N/A
051-07615 E-MEM with L-Glutamine and Phenol Red E-MEM ，带有L-谷氨酰胺和酚红 500mL N/A
134-17225 MEMα with L-Glutamine, Sodium Pyruvate and Nucleosides MEMα  ，带有L-谷氨酰胺、丙酮酸钠和核苷 500mL N/A
392-02115 HIPOLYPEPTON 酪蛋白胨 500g N/A 多聚蛋白胨，以产自新西兰的酪蛋白为原料
394-02175 HIPOLYPEPTON S 大豆蛋白胨S 500g N/A 以脱脂大豆为原料，用动植物酶分解
397-02121 HIPOLYPEPTON N 大豆蛋白胨N 300g N/A 以大豆萃取物为原料，用微生物酶分解
393-02101 HIPOLYPEPTON NS 大豆蛋白胨NS 300g N/A 以脱脂大豆为原料，用微生物酶分解
394-02131 DRIED YEAST EXTRACT SH 酵母浸出粉 SH 250g N/A 发酵工业
398-02151 DRIED YEAST EXTRACT D-3H 酵母浸出粉 D-3H 250g N/A 发酵工业
393-02167 DRIED YEAST EXTRACT FH 酵母浸出粉 FH 10kg N/A 发酵工业
047-30522 Dextran 60,000 葡聚糖，右旋糖酐 25g 9004-54-0 增粘剂
049-22331 Dextran 40,000 葡聚糖，右旋糖酐 50g 9004-54-0 增粘剂
046-32591 Dextran 150,000 葡聚糖，右旋糖酐 50g 9004-54-0 增粘剂
041-22612 Dextran 200,000 葡聚糖，右旋糖酐 25g 9004-54-0 增粘剂、白血球分离用
038-22361 Collagenase 胶原酶 100mg 9001-12-1 来源于溶组织梭菌，用于肝脏、副甲状腺、胰脏兰式小岛的细胞分散
038-17851 Collagenase Type V 胶原酶，V型 100mg 9001-12-1 来源于溶组织梭菌，用于胰脏的分散
031-17601 Collagenase Type I 胶原酶， I 型 100mg 9001-12-1 肝脏、肺、上皮组织、脂肪组织的细胞分散
035-17861 Collagenase Type X 胶原酶， X 型 100mg 9001-12-1 骨、心脏、胸腺、唾液腺的细胞分散
031-22591 Collagenase Type I, Filtered 胶原酶， I 型，过滤 50mg 9001-12-1 Collagenase Type I 经过过滤处理的产品，溶解后直接用于细胞分散
038-23961 Collagenase Type X, Filtered 胶原酶， X 型，过滤 50mg 9001-12-1 Collagenase Type X经过过滤处理的产品，溶解后直接用于细胞分散
036-23141 Collagenase, recombinant, Animal-derived-free 胶原酶，重组，不存在动物源成分 240000units N/A 6,000units/mg以上
035-24071 Collagenase, Purified 胶原酶，精制 5000units 9001-12-1 胰脏、耳下腺腺房的分散以外，也能用于胶原蛋白的结构解析
164-14004 Proteinase K, from Tritirachium album Limber 蛋白酶k 25mg 39450-01-6 裂解细胞

Wako氨基酸混合标准溶液

发表于由

Wako氨基酸混合标准溶液

日立氨基酸分析仪(Hitachi)在国内应用较为普遍，主要使用的型号为L-8500型，L-8500A型，L-8800型，L-8900型等多种型号，采用柱后衍生、用茚三酮显色液作为衍生试剂的离子交换色谱法,,配套缓冲液作为洗脱试剂的工作方式。日立本身并不生产试剂，其仪器的配套试剂都是由日本的两家大型化学试剂生产商(和光WAKO 和 三菱 MCI)为其生产。不论是什么型号的配套试剂，基本都分3大部分： 1. 缓冲液; 2. 再生液; 3. 显色液，而氨基酸标准品亦是色谱分析试剂必不可少的组成部分。
013-08391 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H
氨基酸混合标准溶液, H型		 5ml 470
019-08393 1ml*5 710
015-14461 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2
氨基酸混合标准溶液, AN-2型		 5ml 700
015-14461 1ml*5A 1030
016-08641 Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B
氨基酸混合标准溶液, B型		 5ml 700
015-14461 1ml*5A 1030

氨基酸混合标准

Wako 013-08391氨基酸混合标准溶液,H型

货号：013-08391
包装：5mL

英文名：Amino Acids Mixture Standard Solution， Type H

级别：氨基酸分析

品牌：Wako

氨基酸混合标准溶液,H型 (013-08391)，含有17种常用的氨基酸和谷氨酸和谷氨酰胺水解形成的氯化铵，用于氨基酸分析仪或高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸成分分析或者测序。

氨基酸标准溶液, H型, 013-08391, 5mL
本产品含有17种常用的氨基酸和谷氨酸和谷氨酰胺水解形成的氯化铵，用于氨基酸分析仪或高效液相色谱(HPLC)进行氨基酸成分分析或者测序。
两种AN-2型氨基酸混标
Wako货号
品名
包装
货期
013-08391
Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H
氨基酸混合标准溶液, H型
5ml
2-3周
019-08393
1mLx5A
2-3周
组成（每种氨基酸浓度2.50 微摩尔/毫升，溶于约0.1摩尔/升盐酸溶液中）
L-Asp, L-天门冬氨酸；
L-Thr, L-苏氨酸；
L-Ser, L-丝氨酸；
L-Glu, L-谷氨酸；
L-Pro, L-脯氨酸；
Gly, 甘氨酸；
L-Ala, L-丙氨酸；
L-Cys, L-胱氨酸；
L-Val, L-缬氨酸；
L-Met, L-蛋氨酸；
L-Ile, L-异亮氨酸；
L-Leu, L-亮氨酸；
L-Tyr, L-酪氨酸；
L-Phe, L-苯丙氨酸；
L-Lys, L-赖氨酸；
L-His, L-组氨酸；
L-Arg, L-精氨酸；
Ammonium Chloride, 氯化铵；
注意事项:
1. 1ml*5A包装为5只1ml装安瓿瓶, 5ml包装为旋口瓶, 2-10度保存
2. 每个安剖中含约1.2毫升
3. 2-10度保存
4. 本产品仅供科研使用，请勿用于人体。

wako磷酸化蛋白电泳试剂- Phos-tag (TM) Acrylamide

发表于由

磷酸化蛋白电泳试剂——wako Phos-tag (TM) Acrylamide

什么是Phos-tag™

Phos-tag ™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子，结合特异性与氨基酸的种类和序列无关，无放射性，无需特意制备磷酸化抗体。它可用于磷酸化蛋白的分离（Phos-tag™ Acrylamide）、Western Blot 检测（Phos-tag ™ Biotin）、蛋白纯化 （Phos-tag ™ Agarose）及质谱分析MALDI-TOF/MS （Phos-tag ™ Mass Analytical Kit） 。

Phos-tag的基本结构：

 

 

 

 

 

 

1. Phos-tag™ Acrylamide

Phos-tag™ Acrylamide SDS-PAGE可根据迁移率不同，区分磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白。该方法只需在常规的SDS-PAGE胶中添加Phos-tag™ Acrylamide和MnCl2即可进行实验（制胶过程中添加，如需详细说明请联系我们）。

特点
# 非放射性元素，非荧光物质
# 磷酸化蛋白亚型可以在同一电泳道分离出多条带
# 操作简便，与常规SDS-PAGE蛋白电泳相似
# Phos-tag™ 的结合特异性与氨基酸种类、序列无关
# Phos-tag™ SDS-PAGE实验后，可进行常规的免疫组化、质谱等
# 性质稳定，溶于蒸馏水后可以稳定保存至少3个月
# 磷酸化和非磷酸化蛋白可以同时被分离检测
# 不同位点磷酸化修饰以及磷酸化程度不同的蛋白在同一泳道中因迁移率不同而被分离开来

原理

应用

1、黄色粘性油状物质；

2、在4度可保存至少一年；

3、Phos-tagTM与丙烯酰胺（Acrylamide，SDS-PAGE分离胶主要成分)结合分离磷酸化和非磷酸化蛋白。

SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子（Zn2+或者Mn2+）和Phos-tagTM Acrylamide。

在蛋白电泳过程中，磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合，导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。

Phos-tag® Acrylamide可根据迁移率不同，区分磷酸化蛋白与非磷酸化蛋白。无放射性、非化学物质标记。不同位点磷酸化修饰的蛋白在同一泳道中因迁移率不同而被分离开来。

操作过程与普通SDS-PAGE相类似。Phos-tagTM的特异性结合与氨基酸种类、序列无关。

适用于免疫印迹、质谱分析等后续工作。可识别磷酸化和非磷酸化蛋白。

Phos-tagTM母液可稳定保存至少3个月。

可检测出具有不同磷酸基团数目的蛋白。无需特意制备磷酸化抗体。

产品编号 产品名称 规格 原价
304-93526 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3ml 2670
300-93523 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 2mg 4450
304-93521 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 10mg 10680

Phos-tag Acrylamide (AAL-107)     Wako Cat. #304-93521 (10 mg)]⇒ Protocol(点击进入下载)


Phos-tag Acrylamide (AAL-107)   Wako Cat. #300-93523 (2 mg)]⇒ Protocol(点击进入下载)

 

 

References  参考文献：

    1. “Recognition of phosphate monoester dianion by an alkoxide-bridged dinuclear zinc (II) complex”, E. Kinoshita, M. Takahashi, H. Takeda, M. Shiro, and T. Koike, Dalton Trans., 21, 1189-1193 (2004).

 

    1. “Phosphate-binding tag, a new tool to visualize phosphorylated proteins”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, K. Takiyama, and T. Koike, Mol. Cell.
      Proteomics      , 5, 749-757 (2006).

 

    1. “A single nucleotide polymorphism genotyping method using phosphate-affinity polyacrylamide gel electrophoresis”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, and T. Koike, Anal. Biochem., 361, 294-298 (2007).

 

    1. “Label-free kinase profiling using phosphate affinity polyacrylamide gel electrophoresis”, E. Kinoshita-Kikuta, Y. Aoki, E. Kinoshita, and T. Koike, Mol. Cell. Proteomics, 6, 356-366 (2007).

 

    1. “Separation of a phosphorylated-His protein using phosphate-affinity Polyacrylamide gel”, S. Yamada, H. Nalkamura, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, and Y. Shiro, Anal. Biochem., 360, 160-162 (2007).

 

    1. “A mobility-shift detection method for DNA methylation analysis using phosphate-affinity polyacrylamide gel electrophoresis”, E. Kinoshita-Kikuta, E. Kinoshita, and T. Koike, Anal. Biochem., 378, 102-104 (2008).

 

    1. “Separation of phosphoprotein isotypes having the same number of phosphate groups using phosphate-affinity SDS-PAGE”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, M. Matsubara, S. Yamada, H. Nakamura, Y. Shiro, Y. Aoki, K. Okita, and T. Koike, Proteomics, 8, 2994-3003 (2008).

 

    1. “FANCI phosphorylation functions as a molecular switch to turn on the Fanconi anemia pathway”, M. Ishiai, H. Kitao, A. Smogorzewska, J. Tomida, A. Kinomura, E. Uchida, A. Saberi, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, T. Koike, S. Tashiro, S. J. Elledge, and M. Takata, Nature Struct. Mol. Biol., 15, 1138-1146 (2008).

 

    1. “Two-dimensional phosphate affinity gel electrophoresis for the analysis of phosphoprotein isotypes”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, M. Matsubara, Y. Aoki, S. Ohie, Y. Mouri, and T. Koike, Electrophoresis, 30, 550-559 (2009).

 

    1. “Phosphate-affinity Gel Electrophoresis Using a Phos-tag Molecule for Phosphoproteome Study”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, and T. Koike, Current Proteomics, 6, 104-121 (2009).

 

    1. “Mobility shift detection of phosphorylation on large proteins using a Phos-tag SDS-PAGE gel strengthened with agarose”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, H. Ujihara, and T. Koike, Proteomics, 9, 4098-101 (2009).

 

  1. “Separation and detection of large phosphoproteins by using Phos-tag SDS-PAGE”, E. Kinoshita, E. Kinoshita-Kikuta, and T. Koike, Nature Protocols, 4, 1513-21 (2009).

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

发表于由

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法

英  文  名： Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution

产　　地： 日本

商　　家： Wako（和光纯药工业株式会社）

wao Phos-tag™实验设计

◆  研究领域

磷酸化蛋白和磷酸化多肽的研究

◆  Phos-tagTM 的简介

Phos-tagTM（Phosphate-binding tag）是由日本广岛大学的Kinoshita等研制的磷酸化蛋白蛋白捕获分子。Phos-tagTM 螯合Zn2+或者Mn2+等重金属离子后形成一个半封闭的空间。在pH值6~8的中性条件下，该空间恰好能容纳一个磷酸基团，使得螯合有金属离子的Phos-tagTM 分子能够与磷酸基团牢固而稳定的结合。可以特异性结合所有氨基酸的磷酸化基团，广泛运用于细菌，酵母，昆虫等物种研究。

◆  Phos-tagTM 系列产品

利用螯合有金属离子的Phos-tagTM 可以特异性结合磷酸化基团的特点，研发了Phos-tagTM 系列产品，运用于常见的蛋白实验，比如SDS-PAGE，免疫印迹，亲和层析，质谱等。

Phos-tagTM 系列产品 产品描述 用途 具体运用实验
Phos-tagTM   Acrylamide Phos-tagTM 与丙烯酰胺（Acrylamide，SDS-PAGE分离胶主要成分)结合 分离磷酸化和非磷酸化蛋白。SDS-PAGE分离胶制备中添加金属离子（Zn2+或者Mn2+）和Phos-tagTM Acrylamide。在蛋白电泳过程中，磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Acrylamide发生特异性结合，导致磷酸化蛋白的迁移速度变慢。 SDS-PAGE（单一蛋白）

免疫印迹（多种蛋白混合液，例如细胞裂解液，组织均浆液，体外激酶反应体系。使用目的蛋白的非磷酸化抗体作为一抗）
Phos-tagTM Biotin Phos-tagTM 与生物素（Biotin）结合 可与亲和素标记的HRP结合，检测磷酸化蛋白。 免疫印迹（正常SDS-PAGE）
Phos-tagTM  Agarose Phos-tagTM 与琼脂糖（Agarose）结合 利用磷酸化基团与金属离子螯合的Phos-tagTM Agarose特异性结合，纯化磷酸化蛋白。 亲和层析法
Phos-tagTM Mass Analytical kit Phos-tagTM 与不同荷质比的Zn结合 检测微量磷酸化蛋白和磷酸化多肽。 质谱实验

备注：除Phos-tagTM Mass Analytical kit之外，其他Phos-tagTM 系列产品都需要配置金属离子溶液。

Phos-tag™ 系列磷酸化蛋白新方法！
Phos-tag™ 是一种能与磷酸离子特异性结合的功能性分子。它可用于磷酸化蛋白的分离（Phos-tag™ Acrylamide）、Western Blot检测（Phos-tag™ Biotin）、蛋白纯化 （Phos-tag™ Agarose）及质谱分析MALDI-TOF/MS （Phos-tag™ Mass Analytical Kit）。

◆Phos-tag™ 的基本结构

◆特点
与-2价磷酸根离子的亲和性和选择性高于其它阴离子
在pH 5-8的生理环境下生成稳定的复合物

◆原理

◆应用

样品类型: 纯化蛋白、组织均浆液、组织裂解液、体外酶反应液
样品来源物种: 无物种特异性，可用于人、植物（拟南芥 水稻 棉花等）、动物（斑马鱼 灵长类等）、微生物(酵母 细菌 真菌等） 昆虫（果蝇 蚕等）
分离蛋白大小: 磷酸化蛋白的分离范围在十几到220kDa，文献报道可分离350kDa的磷酸化蛋白
准备的试剂和仪器: 10mM的MnCl2溶液，固体产品需要溶解于甲醇中,其余与常规SDS-PAGE相同
各包装可做实验次数: 2mg包装20μM可制约20块胶，50μM约8块；10mg包装20μM可制100块胶，50μM约40块
凝胶染色: 考马斯亮蓝、银染、荧光染色、阴性染色

◆相关产品

产品名称 用　　途
　Phos-tag™ Acrylamide 　分离: SDS – PAGE 分离不同磷酸化水平的蛋白
　SuperSep Phos-tag™ 　分离: 预制胶中含有50μM Phos-tag™ Acrylamide
　Phos-tag™ Biotin 　检测: 代替 Western Blot 检测中的磷酸化抗体
　Phos-tag™ Agarose 　纯化: 通用柱层析，纯化磷酸化蛋白
　Phos-tag™ Mass
Analytical Kit		 　分析: 用于质谱 MALDI-TOF/MS 分析，提高磷酸化分子的检测灵敏度

 

Phos-tag Acrylamide（丙烯酰胺）

产品编号 生产商编号 产品名称 规格 Phos-tag在配制胶中的浓度
20μM 50μM 100μM
304-93526 AAL-107S1 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution 0.3mL 约10块 约4块 约2块
300-93523 AAL-107M Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 2mg 约20块 约8块 约4块
304-93521 AAL-107 Phos-tag™ Acrylamide AAL-107 10mg 约100块 约40块 约20块

 

SuperSep Phos-tag™ （丙烯酰胺预制胶）

产品编号 产品名称 产品规格
193-16711 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13 well
Phos-tag 13孔10%预制胶		 5块
190-16721 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 17 well
Phos-tag 17孔10%预制胶		 5块
195-16391 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 13 well
Phos-tag 13孔12.5%预制胶		 5块
193-16571 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well
Phos-tag 17孔12.5%预制胶		 5块
193-16691 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13 well
Phos-tag 13孔15%预制胶		 5块
196-16701 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 17 well
Phos-tag 17孔15%预制胶		 5块
197-16851 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 13 well
Phos-tag 13孔17.5%预制胶		 5块
194-16861 SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 17.5%, 17 well
Phos-tag 17孔17.5%预制胶		 5块
198-17981 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶，BioRad型		 5块
195-17991 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 83×100×3.9mm
Phos-tag™ 预制胶，BioRad型		 5块
192-18001 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 7.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶，Life Technologies型		 5块
199-18011 SuperSep™ Phos-tag™ (50μmol/l), 12.5%, 17well, 100×100×6.6mm
Phos-tag™ 预制胶，Life Technologies型		 5块

Phos-tag™ Biotin（生物素）

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
301-93531 BTL-104 Phos-tag™ Biotin BTL-104 10mg
308-97201 BTL-111S1 Phos-tag Biotin BTL-111 1mM Aqueous Solution 0.1ml

Phos-tag™ Agarose（琼脂糖）

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
302-93561 AG-501 Phos-tag™ Agarose 0.5ml
308-93563 AG-503 Phos-tag™ Agarose 3ml

Phos-tag™ Mass Analytical Kit（质谱分析试剂盒）

产品编号 生产商编号 产品名称 规格
305-93551 MS-101KIT Phos-tag™ Mass Analytical Kit 1 set

SuperSep Phos-tag™ 预制胶即开即用！
phos-tag™ 由日本广岛大学研究生院医齿药学综合研究科医药分子功能科学研究室开发。
SuperSep Phos-tag™ 是一种预制胶，预先加入了50 μmol/L的Phos-tag™ Acrylamide，打开包装即可直接使用。预制胶中含有锌作为金属离子，在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好，得到的结果条带也很整齐。

 板大小  100 x 100 x 3 (mm)
 凝胶大小  90 x 85 x 1 (mm)
 孔数  13  17
 孔容积  30 μL  25 μL
 Phos-tag™浓度  50 μmol/L
 丙烯酰胺浓度  10%、12.5%、15% 和17%
 ZnCl2浓度  100 μmol/L

 

◆优点、特色
·即开即用
·预制胶使用安全
·可长期保存（6个月）
·操作与普通SDS-PAGE一样

◆案例、应用
电泳条件：30 mA（恒电流）, 60分钟
样品：5 ug/Lane α-酪蛋白（含磷酸化与去磷酸化α-酪蛋白）（产品编号038-23221）
普通SDS-PAGE只观察到一条条带，而Phos-tag™ SDS-PAGE里可见α-酪蛋白磷酸化和α-酪蛋白去磷酸化两条
条带。
样品缓冲液：Sample Buffer Solution (2ME+) (X4) (产品编号191-13272)
电泳缓冲液：SDS-PAGE 缓冲液, pH8.5(产品编号192-16801)
染色：QUICK CBB PLUS(产品编号174-00553)
P10%(左) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 10%, 13well
P15%(中) : SuperSep Phos-tag™ (50 μmol/L), 15%, 13well
A15%(右) : SuperSep™Ace, 15%, 13well （不含Phos-tag™）

◆相关产品

产品编号 产品名称 规　　格
 058-07681  EasySeparator <配套电泳槽>  1 套
 230-02461  Wide-View Prestained Protein Size Marker III (11~245kDa)  500 μL (200 次)
 038-23221  α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1 mg

◆具体实例

1. 体外激酶反应，激酶和底物都带有标签，反应后亲和层析法纯化获得激酶和底物，如何检测底物的磷酸化情况？

如果底物和激酶分子量差别大，通过正常的SDS-PAGE能够区分，建议使用Phos-tagTM Biotin。将激酶和底物进行免疫印迹实验，用Phos-tagTM Biotin作为抗体检测底物的磷酸化基团（需记录底物的条带位置）。可通过剥离（strip）方式剥离Phos-tagTM Biotin，用底物的非磷酸化抗体进一步验证其位置。

如果底物和激酶分子量差别不大，可进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验,然后转膜，用底物的非磷酸化抗体检测（没有使用激酶的抗体，所以检测不到激酶的带）。在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE中磷酸化和非磷酸化底物发生分离，用底物的非磷酸化抗体可以检测所有底物。免疫印迹实验后，观察所有的条带，非磷酸化底物由于没有和Mn2+-Phos-tagTM Acrylamide结合，所以迁移速度较快，磷酸化底物则迁移速度变慢。通过迁移率的变化，分析磷酸化底物的含量。

备注：

1） Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中，建议使用α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated（038-

       23221），该产品中含有磷酸化和非磷酸化的α-Casein，确保试剂和实验条件能够分离磷酸化蛋白。

2）如果没有非磷酸化底物，可使用Alkaline Phosphatase(for Biochemistry)（018-10693）对底物进行去磷酸

     化反应。

2. 如何检测EGF（表皮生长因子）刺激后细胞内MAPK的磷酸化水平？

收集EGF刺激的细胞，制备细胞裂解液作为样品。进行正常的SDS-PAGE实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验，转膜后用MAPK的非磷酸化抗体作为一抗进行检测（检测所有的MAPK，包括磷酸化和非磷酸化）。正常SDS-PAGE实验中，磷酸化的MAPK和非磷酸化MAPK没有分离，而在Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验中磷酸化MAPK和非磷酸胡MAPK发生分离，所以转膜后，用MAPK抗体检测，可以看到分离的条带。比较正常的SDS-PAGE用MAPK抗体的免疫印迹实验和Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE用MAOK抗体的免疫印迹实验，多出来的条带就是磷酸化的MAPK。

备注：该实验的前提是EGF刺激后细胞内的MAPK发生磷酸化，细胞内包含磷酸化和非磷酸化的MAPK。如果刺激后细

          胞内不含有磷酸化的MAPK，则无法用Phos-tagTM Acrylamide分离磷酸化和非磷酸化MAPK。

3. 研究蛋白相互作用的实验中，构建带有不同标签的2种融合蛋白，共转染细胞，在细胞内发生磷酸化反应。通过不同标

    签的亲和层析柱获得纯化的蛋白，是否可用Phos-tagTM Agarose纯化，进行后续免疫共沉淀实验（Co-IP）实验？

Phos-tagTM Agarose纯化磷酸化蛋白，采用高盐的洗脱方式，没有使用界面活性剂、还原剂、酸或者碱洗脱，蛋白不发生变性，可进行后续的Co-IP实验。

4. 检测的样品中含有两种磷酸化的蛋白，分子量很接近，如何使用Phos-tagTM 产品检测磷酸化？

如果样品中两种磷酸化蛋白的分子量很接近，通过正常的SDS-PAGE实验无法区分，建议使用Phos-tagTMAcrylamide。进行Mn2+-Phos-tagTM SDS-PAGE实验后用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测。

也可以使用Phos-tagTM Biotin。进行正常SDS-PAGE实验后，先用两种蛋白的非磷酸化抗体进行检测，剥离（strip）后用Phos-tagTM Biotin。如果磷酸化蛋白量少的　话，剥离（strip）会去除一些蛋白，可能会影响检测的效果。

5. 使用Phos-tagTM Mass Analytical kit，样品中如果含有磷酸缓冲液是否有影响？

该试剂盒检测磷酸化蛋白和多肽的灵敏度较高，样品中含有的磷酸缓冲液会影响磷酸化蛋白与Phos-tagTM 结合。