LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物) 货 号 #E3025L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物)                              收藏

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产品特点

LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物)是经过优化的 5X 预混液,包含除引物外第一链 cDNA 合成所需的所有组分。
·该 5X 预混液提供 Luna 反转录酶、dNTP 和小鼠 RNase 抑制剂。
·不含引物剂型可让用户更灵活的选择引物,以达到 cDNA 合成最佳效果
·15 分钟内即可完成第一链 cDNA 合成
·可用于第一链 cDNA 合成、两步法 RT-qPCR、两步法 RT-PCR以及 RNA-seq
·包含无干扰、可视化蓝色示踪染料,有助于减少加样错误
·提供 No-RT 对照预混液,增加实验可信度

产品说明

LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物)包含经过优化后的 5X 预混液,以及除引物外第一链 cDNA 合成所需的所有组分。该预混液含有具备热稳定特性的 Luna 反转录酶,可在更高温下合成 cDNA。试剂盒还提供小鼠 RNase 抑制剂(保护模板 RNA 免受降解)和 dNTP。此外,组分中的蓝色示踪染料可为反转录和下游应用提供可视化示踪。
 
该预混液与随机引物、oligo dT 引物以及基因特异性引物兼容,让 cDNA 合成更灵活。LunaScript 反转录预混液试剂盒(无引物)合成的 cDNA 产物可用于多种下游应用。在实时定量 PCR 中,建议使用混有随机引物及 oligo dT 的混合引物合成 cDNA。与 LunaScript SuperMix 反转录试剂盒(NEB #E3010)一样,无论是 1 μg 总 RNA 还是低拷贝 RNA,该预混液均能提供稳健、线性和灵敏的检测。如需合成长片段或全长 cDNA,则建议使用 oligo dT 引物。仅需 55℃ 孵育 10 分钟,LunaScript 反转录预混液试剂盒(无引物)即可合成长达 9 kb 的 cDNA 产物。试剂盒还提供 No-RT 对照预混液,可快速建立对照反应体系。
 
图 1:三种 cDNA 合成试剂的区别:Supermix、预混液、cDNA 合成试剂盒
LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物)            货   号                  #E3025L
图 2:LunaScript 第一链 cDNA 合成时间最短,仅需 13 分钟
 
LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物)            货   号                  #E3025L
比较不同厂家的 cDNA 合成方案。LunaScript SuperMix 反转录试剂盒和 LunaScript 反转录预混液试剂盒(无引物)所需反应时间最短,并可以耐受高温,降低 RNA 复杂二级结构的影响。
 
图 3:LunaScript 反转录预混液试剂盒(无引物)支持多种下游应用
 
LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物)            货   号                  #E3025L
通过使用不同的引物(例如:随机引物混合液、d(T))23VN 引物或随机六聚体引物),LunaScript 反转录预混液试剂盒合成的 cDNA可适于不同下游应用(例如:RT-qPCR、RT-PCR 和 RNA-seq)。
 
 
图 4:在两步法 RT-qPCR 定量中,LunaScript 反转录预混液试剂盒(无引物)功效稳健
 LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物)            货   号                  #E3025L
 A.使用随机引物混合液(NEB #S1330)和 LunaScript 反转录预混液(无引物)对1 µg 至 100 pg RNA 进行反转录,并进行两步法 RT-qPCR 检测,结果显示:与 LunaScript (NEB #E3010)一致,合成 cDNA 产量均展现出良好的线性度。
B.对于常规转录本,使用 d(T)23VN 引物获得的 cDNA 覆盖度与随机引物混合液一致。但对于长转录本(例如:SMG1),随机引物混合液能更好地覆盖靶基因 5´端,右下角图框所示:RT-qPCR 的靶基因位于 SMG1(16 kb)转录本的 5´端;与随机引物混合液(随机六聚体引物和 dT 锚定引物的混合物)相比,单独使用 dT 锚定引物(d(T)23VN)的 Cq 值延迟
 
图 5:在两步法 RT-qPCR 中,LunaScript 反转录预混液试剂盒(无引物)性能更优异
LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物)            货   号                  #E3025L
A.根据各厂商产品说明书,使用几种市售第一链 cDNA 合成试剂盒将 1 μg–100 pg 人总 RNA 反转录成 cDNA,引物为随产品提供的随机引物。通过 8 个靶基因(丰度、长度和 GC 含
量不同)的 qPCR 结果对 cDNA 产物进行评估。使用 Luna 通用探针法 qPCR 预混液(NEB# M3004)对 cDNA 产物进行 qPCR 检测。结果评估了扩增效率和 ΔCq,其中 ΔCq 衡量低起始量检测和缺乏无模板对照(NTC)扩增(ΔCq=NTC 的平均 Cq-最低起始量的平均 Cq)。绿色框表示靶基因扩增表现(效率=90-110%,ΔCq≥3)。关于该可视化分析方法的详细信息,请在NEB 官网搜索“High-Throughput Data Analysis for qPCR”。
B.根据上述 4 个靶基因(两个经典内参基因和两个其它基因)的 Cq 值和上样量绘制曲线,结果显示:与其它商品化试剂盒相比,LunaScript 的 Cq 值最低。
 
 
图 6:在常规 PCR 或高保真 PCR 中,LunaScript 反转录预混液试剂盒(无引物)能够合成不同长度范围 cDNA
 LunaScript® 反转录预混液试剂盒(无引物)            货   号                  #E3025L

 使用 LunaScript 反转录预混液试剂盒(无引物)将 1 μg Jurkat 总 RNA 反转录成 cDNA,引物为 d(T))23VN,使用标准反应条件 55℃ 孵育 10 分钟,95℃ 孵育 1 分钟。之后使用不同 PCR 扩增试剂对 cDNA 产物进行检测。对于 5 kb以内的常规应用,建议使用 OneTaq 2X 预混液(NEB #M0482);对于高保真扩增,建议使用 Q5 热启动超保真 2X 预混液(NEB #M0494);对于长片段高产量扩增,建议使用 LongAmp Taq 2X 预混液(NEB #M0287)(数据未显示)

Taq 2X 预混液 货 号 #M0270L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Taq 2X 预混液                              收藏

Taq 2X 预混液                  货   号                  #M0270L Taq 2X 预混液                  货   号                  #M0270L Taq 2X 预混液                  货   号                  #M0270L Taq 2X 预混液                  货   号                  #M0270L Taq 2X 预混液                  货   号                  #M0270L Taq 2X 预混液                  货   号                  #M0270L

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概述

Taq DNA 聚合酶是一种耐热聚合酶,具有 5´ →3´ 聚合酶活性和 5´ 结构特异性核酸内切酶活性。该酶是 PCR 中应用最广泛的酶。为了便于各种 PCR 反应,Taq DNA 聚合酶配套有不同的反应缓冲液。标准 Taq缓冲液专门针对已有的 PCR 平台所设计,它是 DHPLC 和高通量实验的理想选择。NEB 设计的 ThermoPol 缓冲液能够提高反应产量,即使是在苛刻的条件下也表现不凡。更为方便的是,Taq DNA 聚合酶还有试剂盒以及预混液两种剂型可供选择。此外还提供了 Quick-Load Taq 2X 预混液剂型,可用于直接凝胶上样。

Taq 热启动 DNA 聚合酶

超高的性价比、有吸引力的商业条款,NEB 的热启动 Taq 是分子诊断和其它应用的理想选择。与化学修饰或基于抗体结合的热启动聚合酶不同,NEB 的热启动 Taq 利用一种基于核酸适配体(aptamer)技术。这种独特的核酸适配体通过非共价键作用与聚合酶结合,从而抑制聚合酶在非许可温度下的聚合反应。这种新方法不需要激活步骤,减少样品降解的可能性、缩短整个反应时间。

其它剂型

为了加样方便,Taq 与 Taq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择。Taq 2X 预混液还有 Quick-Load 的形式,可用于直接凝胶上样。Taq PCR 试剂盒包含 Taq DNA 聚合酶、dNTP 混合液、缓冲液、MgCl和紫色 Quick-Load 2-Log DNA Ladder。
 
多重 PCR 5X 预混液配方经过专门优化可以提高多重 PCR 反应的表现。

浓度

5,000 units/ml。

Taq 缓冲液选择表

Taq 2X 预混液                  货   号                  #M0270L

Quick-Load® Taq 2X 预混液 货 号 #M0271L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Quick-Load®  Taq 2X 预混液                 货   号                  #M0271L Quick-Load®  Taq 2X 预混液                 货   号                  #M0271L Quick-Load®  Taq 2X 预混液                 货   号                  #M0271L Quick-Load®  Taq 2X 预混液                 货   号                  #M0271L Quick-Load®  Taq 2X 预混液                 货   号                  #M0271L

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超高的性价比、有吸引力的商业条款,NEB 的热启动 Taq 是分子诊断和其它应用的理想选择。与化学修饰或基于抗体结合的热启动聚合酶不同,NEB 的热启动 Taq 利用一种基于核酸适配体(aptamer)技术。这种独特的核酸适配体通过非共价键作用与聚合酶结合,从而抑制聚合酶在非许可温度下的聚合反应。这种新方法不需要激活步骤,减少样品降解的可能性、缩短整个反应时间。

其它剂型

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多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S 多重 PCR 5X 预混液                  货   号                  #M0284S

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2,500 units/ml。

参考文献

LongAmp® Taq 2X 预混液                 货   号                  #M0287L

OneTaq® 2X 预混液(提供标准缓冲液) 货 号 #M0482L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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OneTaq® 2X 预混液(提供标准缓冲液)                 货   号                  #M0482L OneTaq® 2X 预混液(提供标准缓冲液)                 货   号                  #M0482L OneTaq® 2X 预混液(提供标准缓冲液)                 货   号                  #M0482L OneTaq® 2X 预混液(提供标准缓冲液)                 货   号                  #M0482L OneTaq® 2X 预混液(提供标准缓冲液)                 货   号                  #M0482L

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OneTaq® 2X 预混液(提供标准缓冲液)                 货   号                  #M0482L

概述

合酶与 Deep Vent DNA 聚合酶的混合物,可用于常规与复杂的 PCR 实验。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶的保真性和聚合能力。OneTaq 反应缓冲液与 High GC Enhancer的组合使得无论模板的 GC 含量高低,都只需最小的优化即能获得最高的产量。

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶利用核酸适配体(aptamer)作为抑制剂,不仅使用方便,而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的干扰。

这种核酸适配体抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合,当温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性,因而能够在室温下建立反应。在正常的热循环条件下 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶即能被激活,无需额外的高温启动步骤。因此 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶能够替换常规的或现有的基于 Taq DNA 聚合酶的 PCR 反应。

与 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶一同提供的有标准反应缓冲液、GC 反应缓冲液和 High GC Enhancer。根据模板的 GC 含量选择缓冲液的建议见下文。

其它剂型

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型。预混液有标准或 GC 缓冲液可供选择,High GC Enhancer 随 GC 缓冲液一同提供。此外这些预混液还有Quick-Load 的形式,可用于直接凝胶上样。关于OneTaqRT-PCR 试剂盒或 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的详细信息见 93 页。

浓度

5,000 units/ml。

OneTaq 缓冲液选择指南

OneTaq® 2X 预混液(提供标准缓冲液)                 货   号                  #M0482L

OneTaq 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)(已停产) 货 号 #M0483S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

合酶与 Deep Vent DNA 聚合酶的混合物,可用于常规与复杂的 PCR 实验。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶的保真性和聚合能力。OneTaq 反应缓冲液与 High GC Enhancer 的组合使得无论模板的 GC 含量高低,都只需最小的优化即能获得最高的产量。

OneTaq热启动 DNA 聚合酶

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶利用核酸适配体(aptamer)作为抑制剂,不仅使用方便,而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的干扰。

这种核酸适配体抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合,当温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性,因而能够在室温下建立反应。在正常的热循环条件下 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶即能被激活,无需额外的高温启动步骤。因此 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶能够替换常规的或现有的基于 Taq DNA 聚合酶的 PCR 反应。

与 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶一同提供的有标准反应缓冲液、GC 反应缓冲液和 High GC Enhancer。根据模板的 GC 含量选择缓冲液的建议见下文。

其它剂型

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型。预混液有标准或 GC 缓冲液可供选择,High GC Enhancer 随 GC 缓冲液一同提供。此外这些预混液还有Quick-Load 的形式,可用于直接凝胶上样。关于OneTaqRT-PCR 试剂盒或 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的详细信息见 93 页。

浓度

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OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液) 货 号 #M0484L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)                  货   号                  #M0484L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)                  货   号                  #M0484L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)                  货   号                  #M0484L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)                  货   号                  #M0484L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)                  货   号                  #M0484L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供标准缓冲液)                  货   号                  #M0484L

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概述

合酶与 Deep Vent DNA 聚合酶的混合物,可用于常规与复杂的 PCR 实验。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶的保真性和聚合能力。OneTaq 反应缓冲液与 High GC Enhancer的组合使得无论模板的 GC 含量高低,都只需最小的优化即能获得最高的产量。

OneTaq热启动 DNA 聚合酶

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶利用核酸适配体(aptamer)作为抑制剂,不仅使用方便,而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的干扰。
这种核酸适配体抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合,当温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性,因而能够在室温下建立反应。在正常的热循环条件下 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶即能被激活,无需额外的高温启动步骤。因此 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶能够替换常规的或现有的基于 Taq DNA 聚合酶的 PCR 反应。
与 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶一同提供的有标准反应缓冲液、GC 反应缓冲液和 High GC Enhancer。
根据模板的 GC 含量选择缓冲液的建议见下文。

其它剂型

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型。预混液有标准或 GC 缓冲液可供选择,High GC Enhancer 随 GC 缓冲液一同提供。此外这些预混液还有Quick-Load 的形式,可用于直接凝胶上样。关于OneTaqRT-PCR 试剂盒或 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的详细信息见 93 页。

浓度

5,000 units/ml。

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OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液) 货 号 #M0485L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)                  货   号                  #M0485L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)                  货   号                  #M0485L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)                  货   号                  #M0485L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)                  货   号                  #M0485L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)                  货   号                  #M0485L OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)                  货   号                  #M0485L

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#M0485L
500 次反应(50 μl 反应体系)
3,249.00

#M0485S
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OneTaq 聚合酶信息

OneTaq® 热启动 2X 预混液(提供 GC 缓冲液)                  货   号                  #M0485L

概述

合酶与 Deep Vent DNA 聚合酶的混合物,可用于常规与复杂的 PCR 实验。Deep Vent DNA 聚合酶的 3´→5´ 外切酶活性提升了 Taq DNA 聚合酶的保真性和聚合能力。OneTaq 反应缓冲液与 High GC Enhancer的组合使得无论模板的 GC 含量高低,都只需最小的优化即能获得最高的产量。

OneTaq热启动 DNA 聚合酶

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶利用核酸适配体(aptamer)作为抑制剂,不仅使用方便,而且减少了引物二聚体和其他次级产物对反应的干扰。

这种核酸适配体抑制剂能够与聚合酶发生可逆结合,当温度低于 45℃ 时抑制聚合酶活性,因而能够在室温下建立反应。在正常的热循环条件下 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶即能被激活,无需额外的高温启动步骤。因此 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶能够替换常规的或现有的基于 Taq DNA 聚合酶的 PCR 反应。

与 OneTaq 热启动 DNA 聚合酶一同提供的有标准反应缓冲液、GC 反应缓冲液和 High GC Enhancer。根据模板的 GC 含量选择缓冲液的建议见下文。

其它剂型

OneTaq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型。预混液有标准或 GC 缓冲液可供选择,High GC Enhancer 随 GC 缓冲液一同提供。此外这些预混液还有Quick-Load 的形式,可用于直接凝胶上样。关于OneTaqRT-PCR 试剂盒或 OneTaq 一步法 RT-PCR 试剂盒的详细信息见 93 页。

浓度

5,000 units/ml。

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Q5® 超保真 2X 预混液 货 号 #M0492L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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概述

Q5 超保真 DNA 聚合酶,以其无与伦比的扩增保真性(> Taq 酶的 100 倍)及其超低的错配率,建立了高保真聚合酶的新标准。Q5 DNA 聚合酶是一种新型聚合酶,携带具有持续合成能力的 Sso7d DNA
结合域,能够提高反应速度、保真度和稳定性。
Q5 反应缓冲液系统使扩增范围更广泛,无论模板 GC 含量的高低,Q5 超保真 DNA 聚合酶均以最少的优化,表现出卓越的扩增能力。对于常规或 GC 含量 ≤ 65% 的复杂模板,使用 Q5 反应缓冲液可以进行可靠的、超强的扩增;对于高 GC 含量的模板(> 65%),添加 Q5 High GC Enhancer 确保最大的扩增性能。

Q5 热启动 DNA 聚合酶

与化学修饰或基于抗体结合的热启动机制相比,NEB 的 Q5 采用了独特的核酸适配体修饰的热启动方式。该核酸适配体结构通过非共价键作用与聚合酶结合,在建立反应时可有效封闭聚合酶活性。Q5 热启动聚合酶在常规热循环条件下才能发挥作用,因此可在室温条件下建立反应体系。Q5 热启动 DNA 聚合酶无需额外的高温激活
步骤,从而减少了样品降解的可能性,缩短了反应时间,使操作更为简便。无论 GC 含量高低,Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶都能表现出高特异性扩增性能和广泛的模板适应性,是您理想的选择。为了加样方便,Q5 和 Q5 热启动 DNA 聚合酶均有单酶或预混液剂型可供选择。预混液中包含 dNTPs、Mg++ 和所有必需的缓冲液组份。

其它剂型

为了加样方便,Q5 DNA 聚合酶有预混液或试剂盒剂型可供选择。Q5 超保真 PCR 试剂盒包含 Q5 超保真 2X Master Mix、无核酸酶污染的水、Quick-Load 紫色 2-Log DNA Ladder。关于 Q5 定点突变试剂盒(包含或不包含感受态细胞)的详细信息见 104 页。

浓度

2,000 units/ml。

更多信息请联系我们。 www.Q5PCR.com

Q5® 超保真 2X 预混液                  货   号                  #M0492L
Q5 (A) 和 Q5 热启动 (B) 超保真 DNA 聚合酶具有超强扩增能力,可用于任何 GC 含量的扩增。使用 Q5 或 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶扩增从低到高不同 GC 含量的人类基因组 DNA。使用 Q5 热启动的反应在室温下建立,所有的反应均为 30 个循环并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

Q5® 超保真 2X 预混液                  货   号                  #M0492L
单酶附带反应缓冲液,可以对富含 AT 和常规的模板进行超强扩增。加入 High GC Enhancer 可以对富含 GC 和复杂的模板进行扩增。为了加样方便,预混液可对多种模板进行超强扩增。

Q5® 超保真 2X 预混液                  货   号                  #M0492L

Q5® 热启动超保真 2X 预混液 货 号 #M0494L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Q5® 热启动超保真 2X 预混液                              收藏

Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L

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100 次 (50 μl 体系)
1,819.00

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500 次 (50 μl 体系,15ml 瓶装)
7,249.00

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Q5 超保真 2X 预混液

Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶

Q5 超保真 PCR 试剂盒Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L

Q5 定点突变试剂

Q5 定点突变试剂盒(不含感受态细胞)

Q5 聚合酶信息

Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L

概述

Q5 超保真 DNA 聚合酶,以其无与伦比的扩增保真性(> Taq 酶的 100 倍)及其超低的错配率,建立了高保真聚合酶的新标准。Q5 DNA 聚合酶是一种新型聚合酶,携带具有持续合成能力的 Sso7d DNA
结合域,能够提高反应速度、保真度和稳定性。
Q5 反应缓冲液系统使扩增范围更广泛,无论模板 GC 含量的高低,Q5 超保真 DNA 聚合酶均以最少的优化,表现出卓越的扩增能力。对于常规或 GC 含量 ≤ 65% 的复杂模板,使用 Q5 反应缓冲液可以进行可靠的、超强的扩增;对于高 GC 含量的模板(> 65%),添加 Q5 High GC Enhancer 确保最大的扩增性能。

Q5 热启动 DNA 聚合酶

与化学修饰或基于抗体结合的热启动机制相比,NEB 的 Q5 采用了独特的核酸适配体修饰的热启动方式。该核酸适配体结构通过非共价键作用与聚合酶结合,在建立反应时可有效封闭聚合酶活性。Q5 热启动聚合酶在常规热循环条件下才能发挥作用,因此可在室温条件下建立反应体系。Q5 热启动 DNA 聚合酶无需额外的高温激活
步骤,从而减少了样品降解的可能性,缩短了反应时间,使操作更为简便。无论 GC 含量高低,Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶都能表现出高特异性扩增性能和广泛的模板适应性,是您理想的选择。为了加样方便,Q5 和 Q5 热启动 DNA 聚合酶均有单酶或预混液剂型可供选择。预混液中包含 dNTPs、Mg++ 和所有必需的缓冲液组份。

其它剂型

为了加样方便,Q5 DNA 聚合酶有预混液或试剂盒剂型可供选择。Q5 超保真 PCR 试剂盒包含 Q5 超保真 2X Master Mix、无核酸酶污染的水、Quick-Load 紫色 2-Log DNA Ladder。关于 Q5 定点突变试剂盒(包含或不包含感受态细胞)的详细信息见 104 页。

浓度

2,000 units/ml。

更多信息请联系我们。 www.Q5PCR.com

Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L
Q5 (A) 和 Q5 热启动 (B) 超保真 DNA 聚合酶具有超强扩增能力,可用于任何 GC 含量的扩增。使用 Q5 或 Q5 热启动超保真 DNA 聚合酶扩增从低到高不同 GC 含量的人类基因组 DNA。使用 Q5 热启动的反应在室温下建立,所有的反应均为 30 个循环并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L
单酶附带反应缓冲液,可以对富含 AT 和常规的模板进行超强扩增。加入 High GC Enhancer 可以对富含 GC 和复杂的模板进行扩增。为了加样方便,预混液可对多种模板进行超强扩增。

Q5® 热启动超保真 2X 预混液                   货   号                  #M0494L

热启动 Taq 2X 预混液 货 号 #M0496L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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热启动 Taq 2X 预混液                   货   号                  #M0496L 热启动 Taq 2X 预混液                   货   号                  #M0496L 热启动 Taq 2X 预混液                   货   号                  #M0496L 热启动 Taq 2X 预混液                   货   号                  #M0496L 热启动 Taq 2X 预混液                   货   号                  #M0496L 热启动 Taq 2X 预混液                   货   号                  #M0496L 热启动 Taq 2X 预混液                   货   号                  #M0496L

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热启动 Taq 2X 预混液                   货   号                  #M0496L

概述

Taq DNA 聚合酶是一种耐热聚合酶,具有 5´ →3´ 聚合酶活性和 5´ 结构特异性核酸内切酶活性。该酶是 PCR 中应用最广泛的酶。为了便于各种 PCR 反应,Taq DNA 聚合酶配套有不同的反应缓冲液。标准 Taq缓冲液专门针对已有的 PCR 平台所设计,它是 DHPLC 和高通量实验的理想选择。NEB 设计的 ThermoPol 缓冲液能够提高反应产量,即使是在苛刻的条件下也表现不凡。更为方便的是,Taq DNA 聚合酶还有试剂盒以及预混液两种剂型可供选择。此外还提供了 Quick-Load Taq 2X 预混液剂型,可用于直接凝胶上样。

Taq 热启动 DNA 聚合酶

超高的性价比、有吸引力的商业条款,NEB 的热启动 Taq 是分子诊断和其它应用的理想选择。与化学修饰或基于抗体结合的热启动聚合酶不同,NEB 的热启动 Taq 利用一种基于核酸适配体(aptamer)技术。这种独特的核酸适配体通过非共价键作用与聚合酶结合,从而抑制聚合酶在非许可温度下的聚合反应。这种新方法不需要激活步骤,减少样品降解的可能性、缩短整个反应时间。

其它剂型

为了加样方便,Taq 与 Taq 热启动 DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择。Taq 2X 预混液还有 Quick-Load 的形式,可用于直接凝胶上样。Taq PCR 试剂盒包含 Taq DNA 聚合酶、dNTP 混合液、缓冲液、MgCl和紫色 Quick-Load 2-Log DNA Ladder。

 

多重 PCR 5X 预混液配方经过专门优化可以提高多重 PCR 反应的表现。

浓度

5,000 units/ml。

Taq 缓冲液选择表

热启动 Taq 2X 预混液                   货   号                  #M0496L

Q5® 血源直扩 2X 预混液 货 号 #M0500L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品特点

· 无需 DNA 纯化,可直接使用人全血细胞或干血斑样品进行扩增

· 通过 Q5® 热启动超保真 DNA 聚合酶进行精准、高效的 PCR
· 优化的缓冲液系统有效提高对扩增抑制成分和化学品的耐受度
· 适配体抑制酶活,为室温下建立反应体系奠定基础
 

产品信息

 Q5® 血源直扩 2X 预混液可以免除 DNA 纯化步骤,直接使用干血斑或含高达 30% 的全血样品进行各种靶标扩增。该预混液包含 Q5® 热启动超保真 DNA 聚合酶,该酶热稳定性好,具有 3′→ 5′ 外切酶活性,融合了具有增强持续合成能力的 Sso7d DNA 结合域,优化的 dNTP 缓冲液有效提高了对血液中扩增抑制成分、抗凝剂以及滤纸上化学品的耐受度。该产品能够从含有 EDTA 钠盐、EDTA 钾盐、枸橼酸钠和肝素钠的全血细胞以及从保存在普通防腐滤纸上的血样品中扩增长达 7.5 kb 的片段。 

Q5® 热启动超保真 DNA 聚合酶扩增性能卓越、保真度高。通过核酸适配体抑制酶活,可在室温条件下建立反应体系。
 
建议使用 NEB’s Tm Calculator 针对于感兴趣的聚合酶/缓冲液确认引物的最适退火温度,与其它 Tm 值估算系统不同,NEB Tm 值估算系统在估算最佳退火温度时,考虑了影响退火温度的缓冲液组分。
 
图 1:Q5® 血源直扩 2X 预混液扩增性能卓越,能够直接扩增全血或干血斑
 
Q5® 血源直扩 2X 预混液            货   号                  #M0500L

根据说明书推荐的标准反应条件,使用 Q5® 血源直扩 2X 预混液进行 35 个循环的 PCR 扩增。使用 LabChip® 微流控分析仪对产率和纯度进行定量,结果分别以圆点的大小和颜色展示:圆点面积越大、绿色越深,则表示扩增性能越强。 A. 以 10% EDTA 保存的人全血为模板,扩增人基因组不同靶标(0.3 至 7.5 kb)。结果以模拟胶图(上)和相应的点图(下)呈现。结果显示:Q5® 血源直扩 2X 预混液在较大范围的模板长度区间内均表现良好。B. 以全血(上)或滤纸干血(底部)为模板,对人类基因组靶标(604 bp)进行扩增。人全血占总反应体积 (50 µl) 的 5-30%。将未经处理的 1 mm 打孔干血斑直接添加到 25 µl 反应体系中(每个反应一个打孔样品)。结果显示:Q5® 血源直扩 2X 预混液对不同的全血含量、防腐剂和各种类型的采血卡纸具有广泛的耐受性。
 
图 2:Q5® 血源直扩 2X 预混液对各种靶标序列均能高效扩增
 
Q5® 血源直扩 2X 预混液            货   号                  #M0500L
使用 Q5® 血源直扩 2X 预混液和其它几种市售血液直扩聚合酶,分别对不同 GC 含量 (23-77%)(A图)和不同长度(2 -7 kb)(B 图)人类基因靶标进行 PCR。以 10% EDTA 保存的人全血为模板。根据说明书建议使用 50 µl 反应体系进行热循环。使用 LabChip® 微流控分析仪进行定量,结果分别以圆点的大小和颜色表示产量和纯度。结果显示:Q5® 血源直扩 2X 预混液对于各种类型的靶标均表现优异。
 
图 3:在各种滤纸,血液防腐剂、反应体系中表现稳定

Q5® 血源直扩 2X 预混液            货   号                  #M0500L
根据说明书推荐的标准反应条件,使用 Q5® 血源直扩 2X 预混液对干血中的人类基因组靶标(604 bp)进行 PCR。将不同抗凝剂抗凝的血样采集于 Whatman 903 或 FTA Elute 卡纸上,在上述干血卡纸打孔,分别直接加入到 20、25 或 50 μl 反应体系中。结果显示:在各种体积的反应体系、抗凝剂或滤纸类型中,均能达到稳健扩增。
 

Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液) 货 号 #M0531L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                              收藏

Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                 货   号                  #M0531L Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                 货   号                  #M0531L Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                 货   号                  #M0531L Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                 货   号                  #M0531L Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                 货   号                  #M0531L

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Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                 货   号                  #M0531L

概述

由于 DNA 序列需要在扩增后进行校正,所以拥有高保真度的 DNA 聚合酶对于 PCR 应用至关重要。由 NEB 生产、质量控制的 Thermo Scientific® Phusion 超保真 DNA 聚合酶兼备高保真度和稳定扩增的性能,适用于所有 PCR 应用。其独特的结构包括一个类似 Pyrococcus 的酶和一个掺入率增强结构域,二者融合在一起。这种组合提升了聚合反应的保真性和速度。可供选择的试剂包括单酶、预混液和试剂盒。Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶有单酶和预混液剂型可供选择。Phusion DNA 聚合酶可用于长片段的扩增,是克隆实验的理想
选择。

其它剂型

Phusion 和 Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择,Phusion 预混液有含 HF 或 GC 缓冲液两种形式。
Phusion PCR 试剂盒包含 Phusion 聚合酶、Phusion HF 和 GC 缓冲液、dNTPs、MgCl2、DMSO 和 DNA
Marker。

浓度

2,000 units/ml。

Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                 货   号                  #M0531L
Phusion 超保真 DNA 聚合酶扩增片段的产量更高,延伸时间更短。使用不同的聚合酶扩增一段 1.2 kb 长
度的 C. elegans 基因组片段。所有扩增反应按照厂家推荐条件重复进行(30 个循环、30 秒或 2 分钟的延伸时间)并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                 货   号                  #M0531L
Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶具有超强扩增能力。
除了 1.3 kb C. elegans 扩增片段,其它扩增片
段模板均为 human Jurkat。扩增长度如上胶图所示。所有扩增反应按照厂家推荐条件(30 个热循
环)重复进行并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

* Phusion DNA Polymerase was developed by Finnzymes Oy, now a part of Thermo Fisher Scientific.
This product is manufactured by New England Biolabs, Inc. under agreement with, and under the performance specifications of Thermo Fisher Scientific. Phusion® is a registered trademark and property of Thermo Fisher Scientific.

许可/专利/免责:参见 390-391 页。

Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 HF 缓冲液)                 货   号                  #M0531L

Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液) 货 号 #M0532L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                              收藏

Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                 货   号                  #M0532L Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                 货   号                  #M0532L Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                 货   号                  #M0532L Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                 货   号                  #M0532L Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                 货   号                  #M0532L

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Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                 货   号                  #M0532L

概述

由于 DNA 序列需要在扩增后进行校正,所以拥有高保真度的 DNA 聚合酶对于 PCR 应用至关重要。由 NEB 生产、质量控制的 Thermo Scientific® Phusion 超保真 DNA 聚合酶兼备高保真度和稳定扩增的性能,适用于所有 PCR 应用。其独特的结构包括一个类似 Pyrococcus 的酶和一个掺入率增强结构域,二者融合在一起。这种组合提升了聚合反应的保真性和速度。可供选择的试剂包括单酶、预混液和试剂盒。Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶有单酶和预混液剂型可供选择。Phusion DNA 聚合酶可用于长片段的扩增,是克隆实验的理想
选择。

其它剂型

Phusion 和 Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择,Phusion 预混液有含 HF 或 GC 缓冲液两种形式。
Phusion PCR 试剂盒包含 Phusion 聚合酶、Phusion HF 和 GC 缓冲液、dNTPs、MgCl2、DMSO 和 DNA
Marker。

浓度

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Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                 货   号                  #M0532L
Phusion 超保真 DNA 聚合酶扩增片段的产量更高,延伸时间更短。使用不同的聚合酶扩增一段 1.2 kb 长
度的 C. elegans 基因组片段。所有扩增反应按照厂家推荐条件重复进行(30 个循环、30 秒或 2 分钟的延伸时间)并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                 货   号                  #M0532L
Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶具有超强扩增能力。
除了 1.3 kb C. elegans 扩增片段,其它扩增片
段模板均为 human Jurkat。扩增长度如上胶图所示。所有扩增反应按照厂家推荐条件(30 个热循
环)重复进行并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

* Phusion DNA Polymerase was developed by Finnzymes Oy, now a part of Thermo Fisher Scientific.
This product is manufactured by New England Biolabs, Inc. under agreement with, and under the performance specifications of Thermo Fisher Scientific. Phusion® is a registered trademark and property of Thermo Fisher Scientific.

许可/专利/免责:参见 390-391 页。

Phusion® 超保真 PCR 预混液(提供 GC 缓冲液)                 货   号                  #M0532L

LongAmp® 热启动 Taq 2X 预混液 货 号 #M0533L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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参考文献

有关该产品特性和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com,www.neb.com。

LongAmp® 热启动 Taq 2X 预混液                  货   号                  #M0533L

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 高保真PCR

Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                              收藏

Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L

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Phusion 聚合酶信息

Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L

概述

由于 DNA 序列需要在扩增后进行校正,所以拥有高保真度的 DNA 聚合酶对于 PCR 应用至关重要。由 NEB 生产、质量控制的 Thermo Scientific® Phusion 超保真 DNA 聚合酶兼备高保真度和稳定扩增的性能,适用于所有 PCR 应用。其独特的结构包括一个类似 Pyrococcus 的酶和一个掺入率增强结构域,二者融合在一起。这种组合提升了聚合反应的保真性和速度。可供选择的试剂包括单酶、预混液和试剂盒。Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶有单酶和预混液剂型可供选择。Phusion DNA 聚合酶可用于长片段的扩增,是克隆实验的理想
选择。

其它剂型

Phusion 和 Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶均有预混液剂型可供选择,Phusion 预混液有含 HF 或 GC 缓冲液两种形式。
Phusion PCR 试剂盒包含 Phusion 聚合酶、Phusion HF 和 GC 缓冲液、dNTPs、MgCl2、DMSO 和 DNA
Marker。

浓度

2,000 units/ml。

Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L
Phusion 超保真 DNA 聚合酶扩增片段的产量更高,延伸时间更短。使用不同的聚合酶扩增一段 1.2 kb 长
度的 C. elegans 基因组片段。所有扩增反应按照厂家推荐条件重复进行(30 个循环、30 秒或 2 分钟的延伸时间)并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L
Phusion 热启动 Flex DNA 聚合酶具有超强扩增能力。
除了 1.3 kb C. elegans 扩增片段,其它扩增片
段模板均为 human Jurkat。扩增长度如上胶图所示。所有扩增反应按照厂家推荐条件(30 个热循
环)重复进行并用微流控芯片技术(microfluidic LabChip® analysis)检测。

* Phusion DNA Polymerase was developed by Finnzymes Oy, now a part of Thermo Fisher Scientific.
This product is manufactured by New England Biolabs, Inc. under agreement with, and under the performance specifications of Thermo Fisher Scientific. Phusion® is a registered trademark and property of Thermo Fisher Scientific.

许可/专利/免责:参见 390-391 页。

Phusion® 热启动 Flex 2X 预混液                  货   号                  #M0536L

WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG) 货 号 #M1708L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)                              收藏

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产品特点

 设计 LAMP 引物,请使用 NEB LAMP Primer Design Tool

·为环介导等温扩增(LAMP)提供便捷的一步法解决方案,可用于 DNA 或 RNA(RT-LAMP)样品
·预混液含热敏 UDG 和 dUTP,降低残留污染风险
·预混液具备完全缓冲力,可兼容不同样品类型,适用于多种检测方法
·温启动技术可在室温下抑制酶活性
·如需了解使用 RT-LAMP 进行 COVID-19 快速筛查,请点击 Learn more
 

产品描述

 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)为 LAMP/RT-LAMP 提供了便捷的一步法解决方案,适用于 DNA 或 RNA 样品。LAMP 和 RT-LAMP 是一种常用等温扩增技术,通过使用 LAMP 特异性引物(用户自备)和链置换 DNA 聚合酶进行靶标核酸的快速检测。该预混液是在优化后 LAMP 缓冲液中混入了 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶。Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart RTx 反转录酶均经过基因工程改造,提高了在 LAMP 和 RT-LAMP 反应中的性能。WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)具备完全缓冲力,可兼容不同样品类型,适用于多种检测方法,包括:浊度检测、实时荧光检测(使用 LAMP 荧光染料时)和终点可视化检测,例如:基于金属离子指示剂的变色检测(羟基萘酚蓝)

 
由于先前扩增的产物会无意中成为后续反应的底物造成污染,因此预混液中的 dUTP 和热敏 UDG 可有效降低残留污染风险。热敏 UDG 在温度>50℃时可完全失活,因此对反应没有影响。
 
图 1:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)适用于多种检测方法
 
 WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)            货   号                  #M1708L
 
使用 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)(NEB #M1708)对 RNA 或 DNA 样品扩增,可通过多种实时(A)和终点(B)检测方法进行结果判定。这些检测方式包括荧光法、不基于 pH 的变色法(例如:羟基萘酚蓝)、浊度法或琼脂糖凝胶电泳。对于实时荧光检测,可使用包含 50X LAMP 荧光染料的试剂盒(NEB #E1708),在常规实时 PCR 仪器的 SYBR®/FAM 通道中进行监测。
 
图 2:LAMP/RT-LAMP 预混液和适用样品类型
 
 WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)            货   号                  #M1708L
NEB 基于 pH 变化的 WarmStart 变色LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含/不含 UDG)(NEB #M1804)(NEB# M1800)缓冲力低,因此可使用 pH 敏感染料进行可视化扩增检测。基于 pH 值改变而产生的颜色变化(如粉红变黄色)所需缓冲力要低,高缓冲力样品或酸性样品可能会影响颜色变化,因此,这种方法限制了检测样品的种类。WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含/不含 UDG)(NEB #M1708,NEB #E1708)(NEB #E1700)是完全缓冲的,可检测所有样品类型,适用于多种检测方法,包括荧光或其它变色染料(例如:羟基萘酚蓝)
 
图 3:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)对人 DNA 和 RNA 靶标进行稳健检测
 

 WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)            货   号                  #M1708L
 

 使用 WarmStart 荧光 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(不含 dUTP/UDG)(NEB #M1700 试剂盒中的组分)和 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)(NEB #M1708)进行 RT-LAMP(RNA 靶标)或 LAMP(DNA 靶标)实验。反应加入 1X LAMP 引物和 1X LAMP 荧光染料后,分别加入三个数量级的 Jurkat RNA 或 Jurkat DNA (10 ng-0.1 ng)和无模板对照(NTC),每个样品做 4 个重复,形成 25 µl 反应体系,置于 96 孔板中 65℃孵育 40 分钟。使用实时热循环仪(Bio-Rad® CFX96)中的 SYBR/FAM 通道进行 15 秒一次的荧光检测。每个点代表荧光信号超过仪器阈值的时间。除了个别说明外,每个样品都检测到所有 4 个重复(注:如果各重复的检测时间相似,则检测点重叠)。总体而言,各样品检测结果显示:NEB #M1700 和 NEB #M1708 性能一致。无模板对照均无扩增。
 
图 4:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)对人 DNA 和 RNA 靶标进行稳健检测
 
WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)            货   号                  #M1708L
通过手动或 TEMPEST® 自动化液体处理工作站(96 孔,25 µl 反应)建立针对于合成 SARS-CoV-2 RNA 样品的 LAMP 检测体系。检测样品为:阳性样品(人总 RNA 混入 5,000、500 或 50 拷贝的合成 SARS-CoV-2 RNA)或无模板对照(NTCs)。经 65℃ 孵育 40 分钟,使用 1X LAMP 荧光染料在实时荧光仪器(Bio-Rad CFX96)中的 SYBR/FAM 通道检测。结果显示:两种体系的检测时间和最低检出限(LOD)结果一致。
 
图 5:WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)兼容不基于 pH 的变色法(例如:羟基萘酚蓝)
 
WarmStart® 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)            货   号                  #M1708L
使用 WarmStart 通用 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)和针对 N 和 E 基因的混合引物对合成 SARS-CoV-2 RNA 进行扩增,使用 0.12 mM 羟基萘酚蓝作为变色金属指示剂。检测样品为:阳性样品(人总 RNA 混入 5,000、500 或 50 拷贝的合成 SARS-CoV-2 RNA)、阴性样本(人总 RNA)或无模板对照(NTCs),如图所示。反应体系(25 µl)经 65℃孵育 45 分钟后,进行肉眼检测。

A.所有阳性样品均显示阳性结果,包括在所有仅含 50 拷贝的低起始量样品(n = 20),颜色明显从紫色变为蓝色。

B.所有阴性样品均未出现颜色变化(n = 32)。
 

 

WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液 货 号 #M1800L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液                              收藏

WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液                 货   号                  #M1800L WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液                 货   号                  #M1800L WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液                 货   号                  #M1800L WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液                 货   号                  #M1800L WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液                 货   号                  #M1800L

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优势及特点

·RNA 和 DNA 模板的 LAMP 扩增反应
·一步完成,随时随地进行 LAMP 反应
·独特的双热启动机制支持室温建立反应体系
·肉眼可见扩增结果,方便检测分析

 

概述

WarmStart Colorimetric LAMP 2X Master Mix 是可视化的 LAMP RT-LAMP 反应混合液(LAMP:环介导等温扩增反应)。预混液经过优化,在特殊 Low-buffer 中含有可视化的 PH 值指示剂及 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶 和WarmStart RTx 反转录酶。在 LAMP 的反应过程中,DNA 聚合酶发挥聚合作用,改变质子数量进而改变 PH 值,使粉色反应液变成黄色,整个反应过程快速,颜色改变清晰,肉眼可见(可以在视频库中找到关于 LAMP 实验以及引物设计概述https://www.neb.com/tools-and-resources/video-library)。该产品可以用于任何 LAMP 或者 RT-LAMP 反应,只需要提供样品和加热装置,在1540分钟内就可以用肉眼读取阳性扩增的结果。

 

              简单可视化的扩增结果

     WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液                 货   号                  #M1800L

      阴性的反应结果显示为粉色,阳性的反应结果会变为黄色

WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG) 货 号 #M1804L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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特性

     一步法环介导的等温扩增(LAMP)的便捷解决方案,可用于 DNA RNA 样品检测。

·   扩增反应快速,反应体系由粉红色变为黄色,使检测结果清晰可视化

·   预混液包含 UDG dUTP,杜绝残留污染风险

·   WarmStart ®的温启动性能在室温下抑制酶活性,可轻松在室温条件下建立反应体系

·   如需了解 LAMP 及等温扩增的更多信息,请点击Learn more

·   如需了解 LAMP 变色反应在 COVID-19 中的应用,请点击Learn how

WarmStart® 变色 LAMP/RT-LAMP 2X 预混液(含 UDG)            货   号                  #M1804L

       阴性结果显示粉红色,阳性结果显示变为黄色

概述

 含 UDG WarmStart® LAMP 变色预混液是由 Bst 2.0 WarmStart DNA 聚合酶和 WarmStart® RTx 反转录酶在特殊的低缓冲力反应溶液中优化形成,该溶液包含可视化的 pH 指示剂,使检测 LAMP RT-LAMP 的结果判定更加简单、快捷。预混液中包含的 dUTP UDG 可有效减少反应间的残留污染。


该系统提供了一种快速、清晰可视化的扩增检测方案,其原理为 DNA 聚合酶在 LAMP 扩增反应中产生大量质子,引发 pH 值的下降,从而使反应液颜色从粉红色变为黄色(如需了解 LAMP 概述和引物设计,请观看 NEB 网站相关视频)。该预混液即可用于 LAMP 也可用于 RT-LAMP 反应,仅需加热装置及样品,即可在 15-40 分钟内肉眼判定阳性结果。

简单可视化的扩增检测

Luna® 通用 qPCR 预混液 货 号 #M3003E-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

Luna® 通用 qPCR 预混液                              收藏

Luna® 通用 qPCR 预混液                 货   号                  #M3003E Luna® 通用 qPCR 预混液                 货   号                  #M3003E Luna® 通用 qPCR 预混液                 货   号                  #M3003E Luna® 通用 qPCR 预混液                 货   号                  #M3003E Luna® 通用 qPCR 预混液                 货   号                  #M3003E

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#M3003L
500次反应
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#M3003V
100次反应
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相关产品:

南极热敏 UDG

特性

· 一种应用对应一种产品,简化选择
· 方便的预混液形式及易操作的实验步骤
· 肉眼可见的示踪染料避免加样失误
· Luna 系列产品经过严格的优化及检测以确保特异性、灵敏度、精确性及可重复性
· 独特校正染料,与多种 qPCR 设备兼容

概述

快速、灵敏、精确的实时荧光染料定量检测 DNA cDNA

使用实时荧光染料定量 PCR 时,最常用的荧光染料是 SYBR® Green I,后者与双链 DNA 结合,检测每个 PCR 循环中的 DNA 扩增情况。Cq 值是循环数量值,即检测到的荧光信号超过背景本底信号域值所经历的循环数,该 Cq 值可用于评估两个或两个以上的样本之间的相对丰度,也可以与已知浓度系列稀释的标准曲线进行对比,读取样本绝对值。

 

NEB Luna Universal qPCR Master Mix 是经过优化的 2X 预混液,可以用于实时定量 PCR检测和目标 DNA 的定量,适用于具有 SYBR®/FAM 通道的大部分 qPCR 设备。预混液含有热启动 Taq DNA 聚合酶及独特校正染料,与一系列 qPCR 设备兼容;预混液中使用了 dUTP,以防止产物残留污染;预混液中还加有非荧光染料,便于建立反应时进行肉眼观察,该染料的光谱与 qPCR 荧光染料不重叠,因此不会影响到实时检测数值。

 

预混液为 2X,包含除了模板和引物以外,用于 PCR 扩增和定量检测的所有组分。可以使用商业化的 qPCR 分析引物,用 Luna qPCR 产品进行基因组 DNA 或者 cDNA 的定量分析。 

 

图表一:NEB Luna Universal qPCR Master Mix qPCR 带来更高灵敏度及可重复性

   Luna® 通用 qPCR 预混液                 货   号                  #M3003E

 使用 Luna Universal qPCR Master Mix 检测目标中 GAPDH 基因的表达情况,模板为 6个分别 10 倍稀释的 Jurkat cDNA (20 ng – 0.2 pg),每个浓度的样品做8个复孔。cDNA 是使用 NEB Protoscript® II First Strand cDNA Synthesis Kit (NEB #E6560) Jurkat 的总 RNA 反转录得来。

  

图表二:NEB Luna Universal qPCR Master Mix 为不同来源的 DNA 都能提供更高灵敏度和精确度的检测和定量

Luna® 通用 qPCR 预混液                 货   号                  #M3003E

 Luna Universal qPCR Master Mix 可以检测不同来源的基因组 DNA。使用 ABI 7500 快速荧光定量仪器,50 ng – 0.5 pg 的基因组 DNA 对目标进行实时定量检测。基因组 DNA使用传统的柱纯化方法纯化。无论从小鼠肾脏的基因组检测 ACTB 基因、烟草基因组 DNA 检测 psbB 基因、还是从酵母基因组 DNA 中检测 rdn18SLuna 产品都有非常优秀的表现。

 

图表三通过与市场上基于染料的 qPCR 试剂对比,NEB Luna 产品体现出了更优的稳定性和特异性

 Luna® 通用 qPCR 预混液                 货   号                  #M3003E

使用 NEB 公司和其它供应商的试剂,分别对来自于 Jurkat 基因组 DNAJurkat cDNA不同丰度、长度和 GC 含量的 16-18 个目的基因进行检测(使用 Bio-Rad 机器检测 10 个基因组模板和 8 cDNA 模板,使用 ABI 的机器检测9个基因组模板和7 cDNA 模板)。每份检测结果由两个实验者根据厂商要求分别得到。使用反应效率、最低检测值以及无模板扩增来衡量结果(ΔCq = average Cq of lowest input – average Cq of non-template control)。此外,一致性、可重复性以及曲线的整体质量评估也作为实验的参考(标准分数)上面的点状图展示了符合可接受的性能标准的百分比(绿框圈起来的点的标准分>3)。不同厂商的结果如上图所示,从左到右分别是:NEBBio-Rad, SsoAdvanced™ Universal SYBR® Green Supermix Roche, FastStart™ SYBR Green Master QIAGEN, QuantiTect® SYBR Green PCR Kit ABI, PowerUP™ SYBR Green Master Mix Promega®, GoTaq® qPCR Master MixNEB Luna Universal qPCR Master Mix 表现优于所有其它供应商试剂的结果。

注释

 1.  引物设计

使用相关软件(如 Primer 3)设计 qPCR 引物时,在减少非特异性扩增和引物二聚体的情况下提高扩增成功率。引物的 GC 含量为 40–60% 可以保证最大的扩增效率。在可能的情况下,尽可能多的输入目标周围区域序列,以便引物序列设计更加完善。使用检索功能,检索相关数据库以避免非特异性扩增。如果模板是 cDNA ,在设计引物的时候可以跨内含子区域来避免基因组的非特异性扩增。相反,如果引物设计在内含子区域则可以保证基因组区域的特异性扩增。

2.  引物浓度

对于大多数模板来说,引物的终浓度 250 nM 就可以达到要求。如果需要的话,引物的浓度可以在 100–500 nM 之间优化。

3.  扩增子长度

为了确保 qPCR 结果的成功和一致性,PCR 效率的最大化非常重要。其中一方面就是设计短的 PCR 产物(70-200 bp)。如果反应产物超出范围,可能需要对实验进行优化(比如增加延伸时间等)

4.  模板准备及相关浓度

Luna qPCR 试剂与通过典型的核酸纯化方法纯化的 DNA 样本都兼容。制备好的 DNA 可以长期稳定储存在包含 EDTA 的缓冲液中(如 1X TE),实验时使用 TE buffer 或者水进行稀释。

一般来说,标准品和未知样品的浓度范围应该在 1 个拷贝到 106 个拷贝之间。如果是大型基因组样本(如人类或老鼠的 gDNA)一般浓度为 50 ng-1 pg。如果是小型基因组样本,可以参考使用1 个拷贝到 106 个拷贝的浓度。对于单一样本的稀释,样本中需要包含多个拷贝和空白对照。对于 cDNA 样本,可以使用 1 μg0.1 pg RNA 的反转录产物。cDNA 样本不需要纯化,但是在使用之前需要至少稀释 10

5.  ROX 校正染料

有些实时定量设备建议使用校正染料(通常是 ROX)来校正由于气泡、微小的体积差别、管与管之间的差异及反应过程中尘埃或者微粒的自发荧光造成的反应差距。Luna Universal qPCR Master Mix 包含了通用型的校正染料,可以兼容不需要使用校正染料以及需要使用低浓度或者高浓度校正染料(ROX)的一系列的荧光定量检测仪器。因此,在使用这些仪器进行 qPCR 实验时,不需要额外的组分。

6.  预防污染

qPCR 是一种非常灵敏的检测方法,前个 qPCR 产物污染下一个样本会带来一系列的问题,如假阳性及灵敏度的下降。防止污染的最好办法就是严格按照程序操作,避免扩增后的开盖。为了进一步满足预防交叉污染的要求,Luna Universal qPCR Master Mix 中包含了 dUTP/dTTP,从而可以在扩增过程中将 U 掺入到 DNA 产物中。qPCR 前使用尿嘧啶 DNA 糖基化酶(UDG)进行预先处理,就可以水解含有尿嘧啶的产物,以防止污染后续试验。使用能够完全失活的 UDG 是至关重要的,否则 UDG 会破坏新合成的 qPCR 产物。

为了避免产物携带污染,在反应体系中加入终浓度为 0.025 units/μl 的南极热敏 UDGNEB #M0372)。欲将污染的可能性降到最低,最好在室温下建立反应或者在变性步骤前加上

25℃ 温育 10 分钟

7.  反应条件设定

由于聚合酶的热启动性,在实验前不需要预热机器,也不需要在冰上加样。

如果使用96 孔板,建议使用 20 μl 反应体积。

如果使用 384 孔板,建议使用 10 μl 反应体积。在设定仪器的循环条件时,保证在延伸结束时包含一次读板并在循环结束后生成溶解曲线以分析产物的特异性。

大部分应用分析反应 40 个循环就可以,低起始量的样本可以反应 45 个循环。

Luna® 通用探针法 qPCR 预混液 货 号 #M3004E-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – qPCR & RT-qPCR

Luna® 通用探针法 qPCR 预混液                              收藏

Luna® 通用探针法 qPCR 预混液                 货   号                  #M3004E Luna® 通用探针法 qPCR 预混液                 货   号                  #M3004E Luna® 通用探针法 qPCR 预混液                 货   号                  #M3004E Luna® 通用探针法 qPCR 预混液                 货   号                  #M3004E Luna® 通用探针法 qPCR 预混液                 货   号                  #M3004E

货 号
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价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#M3004E
2500次反应
9,169.00

#M3004L
500次反应
2,259.00

#M3004S
200次反应
1,019.00

#M3004V
100次反应
539.00

#M3004X
1000次反应
4,129.00

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相关产品

南极热敏 UDG

特性

·一种应用对应一种产品,简化选择
·方便的预混液形式及易操作的实验步骤
·肉眼可见的示踪染料避免加样失误
·Luna 系列产品经过严格的优化及检测以确保特异性、灵敏度、精确性及可重复性
·独特校正染料,与多种 qPCR 设备兼容

概述

  NEB Luna 通用 qPCR 预混液是经过优化的2X 预混液,用于实时定量 PCR 检测和目标 DNA 的定量,适用于具有 SYBR®/FAM 通道的大部分 qPCR仪器。

NEB Luna 通用探针法 qPCR 预混液是经过优化的2X 预混液,通过使用水解探针来进行实时定量PCR 检测和目标 DNA 的定量。
Luna 预混液中含有热启动 Taq DNA 聚合酶及独特校正染料,可以兼容多种仪器平台,包含需要ROX 染料校正的仪器。这意味着实验操作过程中不需要额外添加染料。预混液中包含 dUTP,qPCR前使用 NEB 的南极热敏 UDG 进行预处理以防止产物残留污染。预混液中还加有肉眼可见的蓝色染料,在向透明多孔 PCR 板中加样时起指示作用。快速、灵敏、精确的 Luna qPCR 产品必将成为您实时定量实验的首选。

luna产品选择表

Luna® 通用探针法 qPCR 预混液                 货   号                  #M3004E 

LunaScript® 反转录 SuperMix 预混液 货 号 #M3010E-NEB酶试剂 New England Biolabs

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LunaScript® 反转录 SuperMix 预混液                              收藏

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
广州库存
成都库存
苏州库存

#M3010E
2500 rxns
74,369.00

#M3010L
100 rxns
4,249.00

#M3010X
500 rxns
16,999.00

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产品描述

该产品为不含 No-RT 对照和无核酶水的预混液剂型
LunaScript® 反转录 SuperMix 试剂盒 (NEB #E3010) 包含反转录预混液、No-RT 对照、无核酶水
适用于 ARTIC SARS-CoV-2 测序流程,是 NEBNext® ARTIC SARS-CoV-2 试剂盒中的组分之一。
 

特性

· 单管预混液剂型,包含:随机六聚体引物和 oligo-dT 引物、dNTP、小鼠 RNase 抑制剂,以及 Luna 反转录酶。
·15 分钟内即可完成第一链 cDNA 合成,
·新型热稳定型 Luna 反转录酶能够有效改善实验表现
·与 Luna qPCR 预混液 (NEB #M3003,M3004) 联合使用,提升 RT-qPCR 检测功效
·包含无干扰、可视化蓝色示踪染料,有助于减少加样错误
·无引物剂型货号为 NEB #E3025
·该产品为不含无核酶水和 No-RT 对照的预混液剂型
 
1.   Josh Quick 2020. nCoV-2019 sequencing protocol v3 (LoCost).
     https://www.protocols.io/view/ncov-2019-sequencing-protocol-v3-locost-bp2l6n26rgqe/v3

概述

 LunaScript 反转录 SuperMix 为优化的反转录预混液,可用于第一链 cDNA 合成、扩增子测序,以及两步法 RT-qPCR。该预混液含有具备热稳定特性的 Luna 反转录酶,可在更高温下合成 cDNA。试剂盒还提供小鼠 RNase 抑制剂,以保护模板 RNA 免受降解。LunaScript 反转录 SuperMix 预混液含有随机六聚体引物,Oligo-dT 引物,可均匀覆盖整个 RNA 靶标。此外,预混液还包含蓝色染料,可在两步法 RT-qPCR 起到示踪作用。样品起始量从高达 1 µg 到低至单拷贝 RNA,均能得到稳健、线性和灵敏的检测结果。

LunaScript 反转录预混液试剂盒(无引物) (NEB #E3025) 包含除引物外,第一链 cDNA 合成所需的所有组分,适用于 RT-PCR、RNA-seq 及其它应用。该预混液与随机引物、oligo dT 引物以及基因特异性引物兼容,让 cDNA 合成更灵活。更多信息请点击 https://www.neb.cn/products/e3025-lunascript-rt-master-mix-kit-primer-free

与 LunaScript 试剂盒版本 (NEB #E3010) 相比,该 LunaScript 预混液版本不含无核酶水和 No-RT 对照。更多信息如下:

图 1:LunaScript 产品比较

 LunaScript® 反转录 SuperMix 预混液            货   号                  #M3010E

图 2:一步法和两步法 RT-qPCR 产品选择

LunaScript® 反转录 SuperMix 预混液            货   号                  #M3010E

图 3:LunaScript® SuperMix 反转录预混液在两步法 RT-qPCR 实验中展现了出色的灵敏度、线性关系和重复性

LunaScript® 反转录 SuperMix 预混液            货   号                  #M3010E

 

在 20 μl 反应体系中,使用 1 X LunaScript 反转录 SuperMix预混液,在标准反应条件下(25℃/2 分钟,55℃/10 分钟,95℃/1 分钟)将 RNA 反转录为 cDNA。然后使用 1 μl cDNA 作为模板和 Luna 通用 qPCR 预混液(NEB#M3003)进行 qPCR 定量,每种浓度做三个重复。
A. 将梯度稀释的 Jurkat 总 RNA(1 μg–1 pg)反转录为 cDNA,然后对 β-actin 进行 qPCR 定量。
B. ERCC 对照(External RNA Controls Consortium)mix1 RNA 包含 50 – 5×109 拷贝的ERCC00130(10 fg–~10 ng),反转录为 cDNA 后进行 qPCR 进行定量。

图 4:LunaScript 反转录 SuperMix 预混液可覆盖长转录本

LunaScript® 反转录 SuperMix 预混液            货   号                  #M3010E

在标准反应条件(25℃/2 min、55℃/10 min、95℃/1 min)下,20 μl反应体系中,使用 1X LunaScript 反转录 SuperMix 预混液,将 Jurkat 总 RNA (1 μg – 1 ng) 反转录为 cDNA。取 1 μl cDNA 产物做为模板,使用 Luna 通用 qPCR 预混液 (NEB #M3003) 和覆盖 HERC1 整个 15.2 kb 转录本的 8 对引物,对 cDNA 覆盖度进行 qPCR 评估。结果显示:所有扩增靶标在每个上样浓度的重复实验中,均有良好扩增。

 

图 5:LunaScript 反转录 SuperMix 预混液对 RNA 靶标展现了出色的线性检测能力

LunaScript® 反转录 SuperMix 预混液            货   号                  #M3010E

使用市售的 cDNA 合成预混液,根据各厂商产品说明书,将 100 pg–1 μg 人(Jurkat)总 RNA 反转录为 cDNA。然后通过 8 个靶标(丰度、长度和 GC 含量不同)的 qPCR 结果对 cDNA 产物进行评估。使用 Luna 通用 qPCR 预混液(NEB#M3003)或 Luna 通用探针法 qPCR 预混液(NEB#M3004)进行 qPCR 检测。结果评估了扩增效率和 ΔCq,其中 ΔCq 衡量低起始量检测和缺乏无模板对照(NTC)扩增(ΔCq = NTC 的平均 Cq–最低起始量的平均 Cq)。绿色框表示目标扩增表现(效率 = 90-110%,ΔCq≥3)。
了解更多“Dots in Boxes”可视化荧光定量评价方法,请登陆:https://www.neb.cn/tools-and-resources/video-library/dots-in-boxes-visualization-of-qpcr-data

 

图 6:LunaScript 反转录 SuperMix 预混液的第一链 cDNA 合成时间最短,仅需 13 分钟。

LunaScript® 反转录 SuperMix 预混液            货   号                  #M3010E

比较了不同厂家的 cDNA 合成方案。LunaScript 反转录 SuperMix 预混液需要的反应时间最短,并可以耐受高温,避免了 RNA 复杂二级结构的影响。

 

图 7:LunaScript 反转录 SuperMix 预混液在室温条件下稳定性极佳

LunaScript® 反转录 SuperMix 预混液            货   号                  #M3010E

LunaScript 反转录 SuperMix 预混液与其它市售反转录产品在 25℃条件下放置 15 天,之后在说明书推荐反应条件下,以 100 pg–1 μg 人总 RNA (Jurkat) 为模板,反转录成为 cDNA。使用 Luna 通用 qPCR 预混液(NEB#M3003)对 8 个不同丰度、长度和 GC 含量的靶标进行 qPCR 检测。结果评估了扩增效率和 ΔCq,其中 ΔCq 衡量低起始量检测和缺乏无模板对照(NTC)扩增(ΔCq = NTC 的平均 Cq – 最低起始量的平均 Cq)。绿色框表示目标扩增表现(效率 = 90-110%,ΔCq≥3)。

 

 

 

 

 

 

 

LAMP 内标对照引物预混液(rActin) 货 号 #S0164S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 等温扩增和链置换

LAMP 内标对照引物预混液(rActin)                              收藏

货 号
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#S0164S
50 reactions
1,199.00

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产品特性

·以 10X 浓度提供
·为优化的 6 条引物(F3、B3、FIP、BIP、LF、LB),靶向 Actin RNA 的跨外显子连接处
·用于 LAMP 检测的对照反应,以验证实验和试剂的性能
·为 SARS-CoV-2 快速变色 LAMP 检测试剂盒(NEB #E2019)的内标对照组分
·点击如下链接,查看如何使用本套引物和 WarmStart® LAMP(含UDG)试剂检测 SARS-CoV-2 病毒 RNAhttps://international.neb.com/-/media/nebus/files/application-notes/appnote_optimizing_rapid_isothermal-workflow_for_sars-cov-2_with_warmstart_lamp_with_udg.pdf?rev=1972ec224ec54ce38f58669cd791e63d 

·  如需自己设计 LAMP 引物,请使用 NEB LAMP Primer Design Tool

·了解 LAMP 和其它等温扩增方法,请点击https://international.neb.com/applications/dna-amplification-pcr-and-qpcr/isothermal-amplification

概述

 LAMP 内标对照引物预混液靶向 Actin RNA 的跨外显子连接处,是扩增 rActin 的引物(F3B3FIPBIPLFLB),用于验证 LAMP 反应中试剂活性、样品处理,以及人源核酸的存在。

该产品为 SARS-CoV-2 快速变色 LAMP 检测试剂盒(NEB #E2019)中的内标对照引物

LAMP 内标对照引物序列(5´→ 3´

rActin Primer Set

Sequence

ACTB-F3

AGTACCCCATCGAGCACG

ACTB-B3

AGCCTGGATAGCAACGTACA

ACTB-FIP

GAGCCACACGCAGCTCATTGTATCACCAACTGGGACGACA

ACTB-BIP

CTGAACCCCAAGGCCAACCGGCTGGGGTGTTGAAGGTC

ACTB-LF

TGTGGTGCCAGATTTTCTCCA

ACTB-LB

CGAGAAGATGACCCAGATCATGT

LAMP SARS-CoV-2 引物预混液(N/E) 货 号 #S1883S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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LAMP SARS-CoV-2 引物预混液(N/E)                              收藏

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#S1883S
85 reactions
2,399.00

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产品特性

 

· 新型 SARS-CoV-2 突变体对本套引物有何影响?登陆 Primer Monitor 在线工具(更多信息),查看突变体图谱与引物匹配的最新信息。 

·  10X 浓度提供

·  靶向 SARS-CoV-2 基因组中的 N 基因和 E 基因区域

·  优化形成 2 组引物混合物,提升了 SARS-CoV-2 病毒 RNA 检测的速度和灵敏度

·  SARS-CoV-2 快速变色 LAMP 检测试剂盒(NEB #E2019)的组分之一

·  点击如下链接,查看如何使用本套引物和 WarmStart® LAMP(含UDG)试剂检测 SARS-CoV-2 病毒 RNAhttps://international.neb.com/-/media/nebus/files/application-notes/appnote_optimizing_rapid_isothermal-workflow_for_sars-cov-2_with_warmstart_lamp_with_udg.pdf?rev=1972ec224ec54ce38f58669cd791e63d 

  ·  如需自己设计 LAMP 引物,请使用 NEB LAMP Primer Design Tool

·了解 LAMP 和其它等温扩增方法,请点击https://international.neb.com/applications/dna-amplification-pcr-and-qpcr/isothermal-amplification

·  全球 LAMPgLAMP)联盟发表了一篇综述文献,全面回顾了 LAMP 及其在 COVID-19 疫情中的作用。https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8802757/

 

概述

 LAMP SARS-CoV-2 引物预混液(N/E)是一套靶向两个基因的混合引物,可识别 SARS-CoV-2 基因组中的核衣壳蛋白基因(N)和包膜蛋白基因(E)区域。包含分别靶向两个区域的 2 LAMP 引物(F3B3FIPBIPLFLB),能提高对 SARS-CoV-2 的检测能力。

 

LAMP SARS-CoV-2 引物序列(5´→ 3´

Gene N2 Primer Set

Sequence

E1-F3

TGAGTACGAACTTATGTACTCAT

E1-B3

TTCAGATTTTTAACACGAGAGT

E1-FIP

ACCACGAAAGCAAGAAAAAGAAGTTCGTTTCGGAAGAGACAG

E1-BIP

TTGCTAGTTACACTAGCCATCCTTAGGTTTTACAAGACTCACGT

E1-LF

CGCTATTAACTATTAACG

E1-LB

GCGCTTCGATTGTGTGCGT

 

Gene N2 Primer Set

Sequence

N2-F3

ACCAGGAACTAATCAGACAAG

N2-B3

GACTTGATCTTTGAAATTTGGATCT

N2-FIP

TTCCGAAGAACGCTGAAGCGGAACTGATTACAAACATTGGCC

N2-BIP

CGCATTGGCATGGAAGTCACAATTTGATGGCACCTGTGTA

N2-LF

GGGGGCAAATTGTGCAATTTG

N2-LB

CTTCGGGAACGTGGTTGACC

Gibson Assembly® 组装预混液 货 号 #E2611L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆 & 合成生物学

Gibson Assembly® 组装预混液                              收藏

Gibson Assembly® 组装预混液             货   号                  #E2611L

货 号
规 格
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上海库存
广州库存
成都库存
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#E2611L
50 次反应
7,459.00

#E2611S
10 次反应
1,889.00

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特性

 增加组装产物的成功率,尤其是组装较大或数量较多的片段
 灵活的序列设计,无需克隆位点
 无需 PCR 纯化步骤
 1 小时内完成复杂的组装过程
 DNA 可立即进行转化,或作为 PCR 或 RCA 的模版 

概述

该产品是由 J.Craig Venter 研究所的 Daniel Gibson 博士及其同事发明,由基因组合成公司(Synthetic Genomics)授权予 NEB 公司。不论是片段的长短或末端的相容性,它都可以成功组装多个 DNA 片段。该产品可以在一管内,恒温条件下,有效的连接多个带有重叠序列的片段,Gibson 组装预混液在同一反应缓冲液中有三种不同的酶活性:

• 外切酶活性会产生单链 3´ 突出端,促使互补的末端退火
• 聚合酶活性会填补退火片段的缺口
• 连接酶活性能将组装后的 DNA 切刻处进行连接 

Gibson 组装预混液包括

– Gibson 组装预混液
– NEBuilder 阳性对照 

质保声明

Gibson 组装预混液经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。更多信息请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com 的产品专栏。 

Gibson Assembly® 组装预混液             货   号                  #E2611L

NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液 货 号 #E2621L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – 克隆 & 合成生物学

NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液                              收藏

NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液             货   号                  #E2621L

货 号
规 格
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广州库存
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苏州库存

#E2621L
50 次反应
6,299.00

#E2621S
10 次反应
1,589.00

#E2621X
250 次反应
26,459.00

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特性

NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液             货   号                  #E2621L

概述

NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液可以高效、准确的组装 DNA 片段。不管片段的长度和末端匹配性如何,该方法均可以多片段无缝组装。还可以组装单链寡核苷酸或含 15-80 bp 重叠区的不同片段长度的 DNA 片段。主要用于合成生物学和多片段的一步克隆,该产品操作简单、灵活,以预混液形式提供。在同一反应缓冲液中有几种不同的酶活性:

• 外切酶活性会产生单链 3´ 突出端,促使互补
的末端重复序列退火
• 聚合酶活性会填补退火片段的缺口
• 连接酶活性能将组装后的 DNA 切刻处进行连接

最终形成双链闭合的 DNA 分子, 可以用于 PCR、RCA 或其它的分子生物学应用,以及直接转化到大肠杆菌。
 
 NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒包含高效的 NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液和 NEB 5-alpha
E. coli 感受态细胞,仅 2 小时即可完成组装和转化实验。
 
NEBuilder 高保真试剂盒有两种:含 NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞(克隆试剂盒,NEB #E5520);
含 NEB 10-beta E. coli 感受态细胞(大片段组装试剂盒,NEB #E2623)。NEB 5-alpha 感受态细胞适用于小于等于 15 kb 质粒的转化。对于大于 15 kb质粒的转化,NEB 推荐 NEB 10-beta 感受态细胞。
 
NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液             货   号                  #E2621L

NEBuilder 高保真 DNA 组装克隆试剂盒包含:

 – NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液

– NEBuilder 阳性对照
– NEB 5-alpha E. coli 感受态细胞(高效级)
– SOC Outgrowth 培养基
– pUC19 对照 DNA

NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液包含

– NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液
– NEBuilder 阳性对照 

质保声明

NEBuilder 高保真 DNA 组装预混液经过严格的质控检测,以保证产品的最高效率和纯度。更多详细信息,请登陆 www.neb-china.com 或 www.neb.com。 

NEBuilder® 高保真 DNA 组装预混液             货   号                  #E2621L

平末端/TA 连接酶预混液 货 号 #M0367L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

平末端/TA 连接酶预混液                              收藏

平末端/TA 连接酶预混液                货   号                  #M0367L 平末端/TA 连接酶预混液                货   号                  #M0367L 平末端/TA 连接酶预混液                货   号                  #M0367L 平末端/TA 连接酶预混液                货   号                  #M0367L

货 号
规 格
价 格(元)
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上海库存
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成都库存
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#M0367L
250 次反应
4,839.00

#M0367S
50 次反应
1,219.00

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特性

 连接平末端
 T/A 克隆
 dsDNA 切刻修复
 构建高丰度克隆文库
 连接粘性末端 

概述

平末端/TA 连接酶预混液是一种即用型 2X 预混液,内含 T4 DNA 连接酶、专属连接增强剂和经过优化的缓冲液。该预混液是专门为提高平末端和单碱基突出末端的连接和转化效率而设计,并简化了建立反应所需步骤,优化了酶和缓冲液的最佳比例,以确保稳定、高效的连接,室温下即可快速连接所有末端类型的 DNA。因为该预混液在 -20℃ 储存时为液体状态,所以使用时无需解冻。此外,即使当 DNA 量少且浓度低时仍可进行亚克隆连接,为用户节约宝贵的 DNA 样品,且无需稀释直接转化到多种化学感受态大肠杆菌中。 

来源

纯化自重组 E. coli 菌株,含有编码 T4 DNA 连接酶的基因。 

反应条件

在 10 μl 的反应体系中加入 1X 平末端/TA 连接酶预混液和 DNA 底物,25℃ 温育。10 μl 反应体系中包含 1,800 个 T4 DNA 连接酶粘性末端单位。 

质保声明

该产品经过严格的质量控制检测,以确保最高的纯度和反应效率。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

注意事项

该预混液在 -20℃ 储存时为液体状态。-70℃ 保存时,反复冻融 20 次后,检测反应效率无明显变化。 

瞬时粘性末端连接酶预混液 货 号 #M0370L-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA修饰酶与克隆技术 – DNA 连接酶

瞬时粘性末端连接酶预混液                              收藏

瞬时粘性末端连接酶预混液               货   号                  #M0370L 瞬时粘性末端连接酶预混液               货   号                  #M0370L 瞬时粘性末端连接酶预混液               货   号                  #M0370L

货 号
规 格
价 格(元)
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上海库存
广州库存
成都库存
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#M0370L
250 次反应
4,799.00

#M0370S
50 次反应
1,199.00

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特性

 瞬时连接粘性末端
 dsDNA 切刻修复
 构建高丰度克隆文库 

概述

瞬时粘性末端连接酶预混液是一种即用型 2X 预混液,内含 T4 DNA 连接酶、专属连接增强剂和经过优化的缓冲液。该预混液是专门为瞬时连接粘性末端(2-4 bp)和提高转化效率而设计,它还简化了建立反应所需的步骤,优
化了酶和缓冲液的比例。因为该预混液在 -20℃ 储存时为液体状态,所以使用时无需解冻,特别是无需温育时间就能高效连接粘性末端底物,反应时仅需加入预混液及互补末端 DNA,混匀后转化,从而节省了克隆连接反应的时间。此外,亚克隆连接可以以低浓度在很小的体系里完成,节省用户宝贵的 DNA 样品,并且无需稀释可直接转化到多种化学感受态大肠杆菌中。 

来源

纯化自重组 E. coli 菌株,含有编码 T4 DNA 连接酶的基因。

反应条件

在 10 μl 反应体系中加入 1X 瞬时粘性末端连接酶预混液和 DNA 底物。10 μl 反应体系中包含 1,800 个 T4 DNA 连接酶粘性末端单位。 

质保声明

该试剂经过严格的质量控制检测,以确保酶的高纯度和高效率。详情请登陆 www.neb.com 或 www.neb-china.com。 

注意事项

该预混液在 -20℃ 储存时为液体状态。-70℃ 保存时,反复冻融 20 次后,检测反应效率无明显变化。