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λ-Hind III digest酶试剂盒Takara Clontech

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λ-Hind III digest
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Takara 3403 λ-Hind III digest 100 μg ￥230 λ-Hind III digest λ-Hind III digest λ-Hind III digest
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■ 制品内容
λ-Hind Ⅲ digest (0.5 μg/μl) 100 μg
6X Loading Buffer 1 ml
 
■ 制品说明
本制品是由Bacteriophage λcI857 Sam7 DNA用Hind III 酶切反应后配制而成的。
  片段 大小（bp）  
  A 23,130  
  B 9,416  
  C 6,557  
  D 4,361  
  E 2,322  
  F 2,027  
  G 564  
  H 125  
 
■ 保存
-20℃。
6X Loading Buffer开封后应于室温保存。
 
■ Agarose电泳图像示意图
 
λ-Hind III digest
 
■ 用途
本制品在琼脂糖凝胶电泳时作为DNA分子量大小的衡量标准，可与MEGALABEL™ (Code No.: 6070) 发生激酶交换反应而进行放射性标记。
 
■ 使用注意
λ DNA digest DNA Markers 的原始末端之间经常由COS末端*1结合在一起，在电泳前进行热处理 (60℃, 5分钟)，能使Marker的电泳图像变得更为清晰。热处理前使用TE或TEN*2 buffer稀释以防止片段降解。
*1：片段A和D。
*2：TE buffer + 0.1 M NaCl
 
 

OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – DNA聚合酶与扩增技术 – 常规 PCR

OneTaq® RT-PCR 试剂盒                              收藏

OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S

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#E5310S
30 次反应
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相关产品

小鼠 RNase 抑制剂
M-MuLV 反转录酶
OneTaq 热启动 2X 预混液（提供标准缓冲液）

特性

• 稳定的 RT-PCR 反应
• 便捷的预混液剂型
• OneTaq DNA 聚合酶对各种模板具有超强的扩增能力

概述

OneTaq RT-PCR 试剂盒含有两种强大的预混液，M-MuLV 酶预混液与 OneTaq 热启动 2X 预混液（提供标准缓冲液），可用于两步法的 RT-PCR 实验。这两种混合试剂可确保最快捷的建立反应和最稳定高效的 RT-PCR 反应，为 RT-PCR 反应的提供优秀的重复性和稳定性。
使用两种优化的混合液：M-MuLV 酶混合液和 MMuLV反应混合液合成第一链 cDNA。M-MuLV 酶混合液含 M-MuLV 反转录酶和小鼠 RNase 抑制剂，MMuLV反应混合液中包含 dNTP 和经过优化的缓冲液。该试剂盒还包括两种优化的反转录引物和无核酸酶污染的水。锚定的 Oligo-dT 引物 [d(T)23VN]迫使引物与 polyA 尾的起始端退火。经过优化的随机引物混合液能随机并持续性的与整个 RNA 模板配对，包括 mRNA 与无 polyA 尾的 RNA。

OneTaq RT-PCR 试剂盒组成：

 – 10X M-MuLV 酶混合液

– 2X M-MuLV 反应混合液
– OneTaq 热启动 2X 预混液（提供标准缓冲液）
– 随机引物预混液（60 μM）
– Oligo d(T)23VN 引物（50 μM）**
– 无核酸酶污染的水
OneTaq® RT-PCR 试剂盒 货 号 #E5310S
 
 
脾总 RNA 为模板合成第一链 cDNA，泳道 1、4 和 7
中加入 dT23VN，泳道 2、5 和 8 中加入随机 6 碱基引
物，泳道 3、6 和 9 为阴性对照反应。使用 OneTaq
热启动预混液分别对 beta-actin 基因、GAPDH 基因和
p532 基因进行 35 个循环的扩增，分别得到 1.5 kb 片
段、0.6 kb 片段和 5.5 kb 片段。Marker M 为 2-Log DNA
Ladder（NEB #N3200）。
 

Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells酶试剂盒Takara Clontech

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Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Cellartis Y50035 Cellartis® Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18) Kit 1 Kit ￥20,754 Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
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来源于人类iPS细胞的小肠上皮细胞
(Intestinal Epithelial Cells Derived from Human Induced Pluripotent Stem Cells)
Cellartis Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18) 是来源于人iPS细胞的小肠上皮细胞，具备肠上皮样特征，包括形成紧密连接、表达绒毛蛋白villin和肠转录因子CDX2。与人结肠癌Caco-2细胞系相比，该细胞具有更高的代谢酶CYP3A4和转运蛋白PEPT1的表达，为药物代谢吸收、药物相互作用评估提供更好的预测结果。
Cellartis Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18) Kit 包括1管冻存的细胞Cellartis Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18)和1个试剂盒Cellartis IEC Maturation Kit。解冻的Cellartis Intestinal Epithelial Cells (from ChiPSC18)使用Cellartis IEC Maturation Kit预先培养5天后，可用于各种检测。
 
■ 产品特点
· 解冻5天内细胞形成紧密连接，解冻5-8天后可用于检测
· 细胞高表达肠上皮标志物 (villin、CDX2等)
· 与Caco-2细胞相比，拥有更高的代谢酶CYP3A4和转运蛋白PEPT1的表达
· 细胞形成一个功能性的、可渗透的屏障，可用于预测药物在体内的渗透性和吸收
 
■ 产品应用
· 药物在小肠的吸收和代谢评价
· 药物研发中的ADME分析
· 药物渗透性检测
 
■ 产品组成
· 1 vial of～4.8 x 106 cells
· 1 Cellartis IEC Maturation Kit（IEC Maturation Basal Medium；IEC Supplement A；IEC Supplement B；IEC Supplement C；IEC Supplement D）
 
Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
 
实验例
Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
图1. 紧密连接蛋白ZO-1的免疫荧光染色结果显示，解冻后第5天，hiPSC-derived intestinal epithelial cells (IEC)细胞间形成紧密连接（如闭锁小带zonula occludens）。
 
Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
图2. 在解冻后第7天，与Caco-2细胞相比，hiPSC-derived intestinal epithelial cells (IEC)中高表达肠上皮标志物villin和CDX2。
 
Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
图3. 在解冻后第7天，与Caco-2细胞相比，hiPSC-derived intestinal epithelial cells (IEC)中高表达药物代谢酶CYP3A4和药物转运蛋白PEPT1。
 
 
■ 产品详情请点击：Human Stem Cell Derived Intestinal Epithelial Cells
 
 

基因编辑后克隆基因型确认酶试剂盒Takara Clontech

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基因编辑后克隆基因型确认
品牌 Code No. 产品名称 包装量 价格（元） 说明书 数量
Clontech 632611 Guide-it Genotype Confirmation Kit 100 Rxns ￥5,910 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认 基因编辑后克隆基因型确认
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          基因敲除    
          ↗ 基因编辑后克隆基因型确认 → 基因编辑后克隆基因型确认 → 基因编辑后克隆基因型确认
基因编辑后克隆基因型确认 → 基因编辑后克隆基因型确认 → 基因编辑后克隆基因型确认            
  基因敲入        
          ↘ 基因编辑后克隆基因型确认        
 
 
基因编辑后克隆基因型确认
Guide-it Genotype Confirmation Kit
每个细胞中大部分基因都拥有两个等位基因。CRISPR/Cas9基因编辑可以对特定基因的一个或两个等位基因引入插入突变或缺失突变(indels)。Guide-it Genotype Confirmation Kit提供了一种简单的方法，用于确认特定克隆是一个等位基因突变（单等位基因），还是两个等位基因突变（双等位基因突变），或者是未发生变化（野生型）。实验操作中涉及到从Cas9 和single guide RNA (sgRNA)处理的细胞中扩增靶点序列。扩增出的序列被用在重组Cas9和相同的sgRNA的体外剪切反应。剪切产物通过琼脂糖凝胶电泳，确定基因型。
基因编辑后使用该试剂盒，加快了在大量克隆中筛选所需基因型的进程。每个试剂盒包含足够的试剂，用于100次提取、扩增和剪切反应。
 
产品特点：
· Cas9 和sgRNA体外剪切实验，用于确定单等位基因突变和双等位基因突变
· 包括高纯度的重组Cas核酸酶，用于体外剪切实验
· 流程化的操作步骤，使用来自于细胞的目的基因组DNA直接扩增
 
产品应用：
· CRISPR/Cas9 基因编辑
· CRISPR/Cas9 基因编辑后，单等位基因突变和双等位基因突变的确定
 
实验例：
基因编辑后克隆基因型确认
A图：使用Cas9和靶向C4BPB 基因的sgRNA对HEK 293细胞进行基因编辑。使用Guide-it Genotype Confirmation Kit对获得的15个单细胞克隆进行C4BPB位点的基因型鉴定。图中左侧的野生型 (WT)，单等位基因 (M)，双等位基因 (B)在分析中作为对照。结果表明克隆1，4，10，12是野生型；克隆2是单等位基因突变；以及克隆3，5-9，11和13-15是双等位基因突变。
B图：对A图中挑选的克隆进行测序分析。每个结果中，小写字母代表的是野生型（WT）序列。对于那些在A图中使用基因型鉴定方法确认的双等位基因突变的克隆，进一步测序分析表明克隆7是杂合子，克隆9和11是纯合子。在克隆2中，检测到3种不同的等位基因，可能是因为在HEK 293细胞系中出现拷贝数变异。
（数据来源于Takara Bio USA, Inc.）
 
 
Code No. 产品名称
632611   Guide-it™ Genotype Confirmation Kit
 
产品详情请点击：基因编辑后克隆基因型确认
 
 

EpiMark® 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒 货 号 #E3317S-NEB酶试剂 New England Biolabs

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产品资料 – 表观遗传学 – 表观遗传学

EpiMark® 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒                              收藏

EpiMark® 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒 货 号 #E3317S EpiMark® 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒 货 号 #E3317S EpiMark® 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒 货 号 #E3317S EpiMark® 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒 货 号 #E3317S

货 号
规 格
价 格(元)
北京库存
上海库存
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#E3317S
20 次反应
3,019.00
无
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特性

 定量分析基因座内的 5-hmC 和 5-mC，重复性好
 简单明了的实验步骤
 与现有 PCR 技术相兼容
 可用于高通量用户
EpiMark® 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒 货 号 #E3317S

概述

EpiMark 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒是一种简单快速试剂盒，能对特定 DNA 位点内的 5-羟甲基胞嘧啶（5-hmC）和 5-甲基胞嘧啶（5-mC）进行定性及定量。这种酶学方法包括三步简单操作，利用了同裂酶 MspI 和 HpaII 对甲基化敏感性的不同。
 
简述三步操作如下：基因组 DNA 用 T4 噬菌体β-葡糖基转移酶和 UDP-葡萄糖处理,将所有的 5-羟甲基胞嘧啶（5-hmC）糖基化；用限制性内切酶 MspI 和 HpaII 消化 DNA，这两个同裂酶有不同的甲基化敏感性；然后用终点或实时 PCR 来定性和定量不同的甲基化状态。EpiMa r k 试剂盒的设计目的是简化甲基化分析,增加发现新生物靶标的可能性。

EpiMark 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒包括

– T4 噬菌体 β-葡糖基转移酶
– UDP-葡萄糖
– MspI
– HpaII
– 蛋白酶 K
– 对照 DNA（未修饰的 5-羟甲基胞嘧啶和 5-甲基胞嘧啶)
– 正反向对照引物混合物
– NEBuffer 4
EpiMark® 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒 货 号 #E3317S
用 EpiMark 5-hmC 和 5-mC 分析试剂盒分析 Balb/C 小鼠组织样品（基因座 12）不同的甲基化状态。A）用于甲基化分析的 6 个不同反应的终点 PCR。虚线框中的泳道显示了 5-羟甲基胞嘧啶的存在。B）实时 PCR 数据用于确定 5-羟甲基胞嘧啶和 5-甲基胞嘧啶的数量。结果显示了所选组织中 5-羟甲基胞嘧啶水平的变化。

参考文献

有关该产品性质和应用的参考文献请登陆 www.neb-china.com，www.neb.com。